На главную
На главную

Измерение концентраций пиридата в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов массовой концентрации пиридата в диапазонах 0,05 - 0,5 мг/м3, 0,005 - 0,05 мг/м3 и 0,2 - 2,0 мкг/смыв соответственно.

Обозначение: МУК 4.1.3344-16
Название рус.: Измерение концентраций пиридата в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Статус: введен впервые
Дата актуализации текста: 05.05.2017
Дата добавления в базу: 05.05.2017
Утвержден: 03.03.2016 Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Опубликован: Роспотребнадзор (2016 г. )
Ссылки для скачивания:

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование
Российской Федерации

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций пиридата
в воздухе рабочей зоны, атмосферном
воздухе населенных мест и смывах
с кожных покровов операторов методом
высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания
МУК 4.1.3344-16

Москва 2016

1. Разработаны сотрудниками ФБУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора (Т.В. Юдина, Н.Е. Федорова, В.Н. Волкова).

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 17 декабря 2015 г. № 2).

3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 3 марта 2016 г.

4. Введены впервые.

СОДЕРЖАНИЕ

1. Метрологические характеристики. 3

2. Метод измерений. 5

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы.. 5

3.1. Средства измерений. 5

3.2. Реактивы.. 5

3.3. Вспомогательные устройства, материалы.. 6

4. Требования безопасности. 6

5. Требования к квалификации операторов. 7

6. Условия измерений. 7

7. Подготовка к выполнению измерений. 7

7.1. Очистка органических растворителей. 7

7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ.. 7

7.3. Кондиционирование хроматографической колонки для ВЭЖХ.. 7

7.4. Приготовление градуировочных растворов. 8

7.5. Приготовление растворов внесения. 8

7.6. Установление градуировочной характеристики. 8

7.8. Подготовка салфеток для проведения смыва. 9

8. Отбор и условия хранения проб. 9

8.1. Воздух рабочей зоны.. 9

8.2. Атмосферный воздух. 9

8.3. Условия проведения смыва. 10

9. Выполнение измерений. 10

9.1. Воздушная среда. 10

9.2. Смывы с кожных покровов. 10

9.3. Щелочной гидролиз пиридата до пиридафола. 10

10. Обработка результатов анализа. 11

10.1. Воздушная среда. 11

10.2. Смывы с кожных покровов. 11

11. Оформление результатов измерений. 11

12. Контроль качества результатов измерений. 12

 

 

УТВЕРЖДАЮ

Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный
врач Российской Федерации

А.Ю. Попова

3 марта 2016 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций пиридата в воздухе
рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и
смывах с кожных покровов операторов методом
высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания
МУК 4.1.3344-16

Свидетельство об аттестации № РОСС RU.0001.310430/0236.17.07.15.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов массовой концентрации пиридата в диапазонах 0,05 - 0,5 мг/м3, 0,005 - 0,05 мг/м3 и 0,2 - 2,0 мкг/смыв соответственно.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Пиридат

O-(6-хлор-3-фенилпиридазин-4-ил)-8-октилтиокарбонат (ИЮПАК)

C19H23ClN2O2S

Молекулярная масса: 378,9.

Бесцветное кристаллическое вещество без запаха. Температура плавления: 27,2 °С. Давление паров: 4,810-4 МПа (при 20 °С); 9,9810-4 МПа (при 25 °С). Растворимость в воде при 20 °С: 1,49 г/дм3. Хорошо растворим во многих органических растворителях. Гидролизуется в водных растворах, ДТ50 (при 25 °С) pH 5 - 89 часов, pH 7 - 58,5 часа, pH 9 - 6,2 часа; ДТ50 (при 50 °С) pH 4 - 10,56 часа, pH 9 - 0,3 часа.

Агрегатное состояние в воздушной среде - аэрозоль.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс > 2000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) для кроликов > 2000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC50) для крыс > 4,37 мг/дм3.

Область применения. Пиридат - селективный контактный гербицид класса фенилпиридазинов, используется для борьбы с однолетними двудольными сорными растениями и некоторыми травами в кукурузе, зерновых, рапсе и овощных культурах.

Пиридафол

Пиридафол - CL9673 - основной метаболит пиридата, образуется в процессе его гидролиза.

6-хлор-3-фенилпиридазин-4-ол (IUPAC)

C10H7ClN2O

Молекулярная масса 206,6.

Бесцветное кристаллическое вещество без запаха. Давление паров 1,9410-4 МПа (при 20 °С); 4,010-4 МПа (при 25 °С). Растворимость в воде при 20 °С: 39,9 мг/дм3 (pH 4,75). Константа диссоциации при 25 °С рКа 6,7 (слабая кислота).

1. Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.


Таблица 1

Метрологические параметры

Анализируемый объект

Диапазон определяемых концентраций, мг/м3, мкг/смыв

Показатель точности (граница относительной погрешности), +δ %, P = 0,95

Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости), σr, %

Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости), σR, %

Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости), r, %

Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), R, %

Воздух рабочей зоны

0,05 - 0,5 мг/м3

18

2,9

4,1

8

11

Атмосферный воздух

0,005 - 0,05 мг/м3

19

2,9

4,1

8

11

Смывы с кожных покровов

0,2 - 2,0 мкг/смыв

25

4,6

6,4

13

18

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в табл. 2.

Таблица 2

Анализируемый объект

Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20

предел обнаружения, мг/м3, мкг/смыв

диапазон определяемых концентраций, мг/м3, мкг/смыв

полнота извлечения вещества, %

стандартное отклонение, %

доверительный интервал среднего результата, ±, %

Воздух рабочей зоны

0,05 мг/м3

0,05 - 0,5 мг/м3

95,3

2,9

1,5

Атмосферный воздух

0,005 мг/м3

0,005 - 0,05 мг/м3

95,3

2,9

1,5

Смывы с кожных покровов

0,2 мкг/смыв

02 - 2,0 мкг/смыв

86,0

3,7

2,0


2. Метод измерений

Измерения концентраций пиридата выполняют по метаболиту - пиридафолу - методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором. Хроматографическому измерению предшествует стадия щелочного гидролиза пиридата до пиридафола.

Концентрирование пиридата из воздуха осуществляют на бумажный фильтр высокой плотности, экстракцию с фильтров выполняют ацетонитрилом или ацетоном. Смыв с кожных покровов проводят этиловым спиртом.

Нижний предел измерения пиридафола в анализируемом объеме пробы - 1 нг. Средняя полнота извлечения с фильтров пиридата - 95,27 %, с поверхности кожи - 86,03 %.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства,
реактивы и материалы

3.1. Средства измерений

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны

 

Барометр-анероид с диапазоном измерения атмосферного давления 5 - 790 мм рт. ст.

ТУ 2504-1797-75

Весы аналитические с пределом взвешивания 110 г и пределом допустимой погрешности 0,001 г

ГОСТ Р 53228-08

Гигрометр психрометрический с диапазоном измерений относительной влажности от 30 до 90 %

ТУ 25-11-1645-84

Колбы мерные 2-100-2 и 2-1000-2

ГОСТ 1770-74

Меры массы

ГОСТ OIML R 111-1-09

Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 см3

ГОСТ 29227-91

Пробоотборное устройство 2-канальное с диапазонами расхода 0,2 - 1,0 дм3/мин и 5,0 - 1,0 дм3/мин и пределом допустимой погрешности ±7 %

 

Термометр лабораторный шкальный ТЛ-11, цена деления 1 °С, пределы измерения -35 - 55 °С

ТУ 25-2021.055-83

Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 100, 500 и 1000 см3

ГОСТ 1770-74

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Пиридат, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 99,4 %

 

Пиридафол, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 99,2 %

 

Аммиак, 25 %-й водный раствор

ГОСТ 24147-80

Ацетонитрил для хроматографии, хч

ТУ-6-09-14.2167-84

Ацетон, осч

ГОСТ 2603-79

Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная или деионизованная)

ГОСТ Р 52501-05

Калий марганцовокислый (перманганат калия), хч

ГОСТ 20490-75

Калий углекислый (карбонат калия, поташ), хч, прокаленный

ГОСТ 4221-76

Кислота уксусная, ледяная, хч

ГОСТ 61-75

Метиловый спирт (метанол), хч

ГОСТ 6995-77

Натрий углекислый (карбонат натрия), хч

ГОСТ 83-79

Спирт этиловый (этанол) ректификованный

ГОСТ Р 51652-2000 или ГОСТ 18300-87

Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид фосфора), хч

ТУ 6-09-4173-85

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

3.3. Вспомогательные устройства, материалы

Аппарат для встряхивания

ТУ 64-1-2851-78

Баня водяная

 

Бумажные фильтры высокой плотности, обеззоленные (бумажные фильтры)

ТУ 2642-001-05015242-07

Бязь хлопчатобумажная белая

 

Воронка Бюхнера

ГОСТ 9147-80

Воронки конусные диаметром 40 - 45 мм

ГОСТ 25336-82

Груша резиновая

ТУ 9398-005-0576-9082-03

Колба Бунзена

ГОСТ 25336-82

Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 150 см3

ГОСТ 9737-93

Линейка измерительная

ГОСТ 427-75

Мембраны микропористые капроновые, размер пор 0,45 мкм

ТУ 9471-002-10471723-03

Набор для фильтрации растворителей через мембрану

 

Насос водоструйный

ГОСТ 25336-82

Пинцет медицинский нержавеющий

ГОСТ 21241-89

Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 30

 

Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающим вакуум до 10 мбар

 

Стаканы химические с носиком вместимостью 150 см3

ГОСТ 25336-82

Стекловата

 

Стеклянные емкости вместимостью 100 см3 с герметичной металлической крышкой

 

Стеклянные палочки

 

Установка для перегонки растворителей

 

Фильтродержатель

 

Холодильник обратный

 

Хроматографическая колонка стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращено-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С8, зернение 5 мкм

 

Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50 - 100 мм3

 

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе, освоивших данную методику и подтвердивших экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 12.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки и внесения, растворов для экстракции, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров и салфеток для отбора проб, отбор проб.

7.1. Очистка органических растворителей

7.1.1. Ацетон. Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия и прокаленным карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30. Перегнанный растворитель хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

7.1.2. Ацетонитрил. Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм3 ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм3 ацетонитрила 10 г карбоната калия).

7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 660 см3 бидистиллированной или деионизованной воды, добавляют 5 см3 уксусной кислоты, 340 см3 ацетонитрила, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр и дегазируют. Подвижную фазу хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

7.3. Кондиционирование хроматографической колонки для ВЭЖХ

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.2) при скорости подачи растворителя 1,0 см3/мин до установления стабильной базовой линии.

7.4. Приготовление градуировочных растворов

7.4.1. Исходный раствор пиридафола для градуировки (концентрация 100 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0,0100 г пиридафола, доводят метанолом до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение месяца.

Растворы № 1 - 6 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

7.4.2. Раствор № 1 пиридафола для градуировки (концентрация 10 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 10 см3 исходного раствора пиридафола с концентрацией 100 мкг/см3 (п. 7.4.1), доводят ацетонитрилом до метки.

Градуировочный раствор № 1 хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение месяца.

7.4.3. Рабочие растворы № 2 - 6 пиридафола для градуировки (концентрация 0,05 - 0,5 мкг/см3). В 5 мерных колб вместимостью 100 см3 помещают по 0,5; 1,0; 2,0; 3,0 и 5,0 см3 градуировочного раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см3 (п. 7.4.2), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по п. 7.2, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2 - 6 с концентрацией пиридафола 0,05; 0,1; 0,2; 0,3 и 0,5 мкг/см3 соответственно.

Рабочие растворы для градуировки хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение 14 дней.

7.5. Приготовление растворов внесения

7.5.1. Исходный раствор пиридата для внесения (концентрация 100 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0,0100 г пиридата, доводят метанолом до метки, тщательно перемешивают.

7.5.2. Раствор № 1 пиридата для внесения (концентрация 10 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 10 см3 исходного. раствора пиридата с концентрацией 100 мкг/см3 (п. 7.5.1), доводят ацетонитрилом до метки.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесено-найдено» и контроля качества результатов измерений методом «добавок».

Растворы внесения хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение месяца.

7.6. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика от концентрации пиридафола в растворе, устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки № 2 - 6, приготовленным по п. 7.4.3.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования, указанных ниже. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков пиридафола, на основании которых строят градуировочную зависимость.

Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах.

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны.

Хроматографическая колонка стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращено-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С8, зернение 5 мкм.

Рабочая длина волны: 280 или 246* нм.

________

* Хроматографирование пробы при 2 длинах волн увеличивает надежность идентификации вещества.

Температура колонки: комнатная.

Подвижная фаза: ацетонитрил-вода-уксусная кислота (34:66:0,5, по объему).

Скорость потока элюента: 1,0 см3/мин.

Объем вводимой пробы: 20 мм3.

Линейный диапазон детектирования: 1 - 10 нг.

7.7. Подготовка фильтров для отбора проб воздуха

Диаметр бумажного фильтра должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродержателя.

Фильтры последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом, затем ацетонитрилом порциями 25 - 30 см3, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

7.8. Подготовка салфеток для проведения смыва

7.8.1. Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5 % (5 %-й раствор). Навеску (25 ± 0,1) г натрия углекислого помещают в мерную колбу вместимостью 500 см3, растворяют в деионизированной воде, доводят водой до метки, перемешивают.

7.8.2. Подготовка салфеток для проведения смыва. Вырезают салфетки (лоскуты) из белой бязи размером 10×10 см, затем их последовательно обрабатывают 5 %-м раствором углекислого натрия (при кипячении), водой до нейтральной реакции промывных вод, 2-кратно промывают этиловым спиртом, сушат на воздухе при комнатной температуре. До использования салфетки хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

8. Отбор и условия хранения проб

8.1. Воздух рабочей зоны

Отбор проб осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны» и Р 2.2.2006-05 (прилож. 9, обязательное) «Общие методические требования к организации и проведению контроля содержания вредных веществ в воздухе рабочей зоны», п. 2 «Контроль соответствия максимальным ПДК».

Воздух с объемным расходом 4 - 5 дм3/мин аспирируют через бумажный фильтр, помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации вещества на уровне 0,05 мг/м3 необходимо отобрать 10 дм3 воздуха.

Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильнике (4 - 5 °С) - 14 дней. Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру при температуре (-18 ± 2) °С.

8.2. Атмосферный воздух

Отбор проб осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ 17.2.4.02-81 «ОПА. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест». Воздух с объемным расходом 4 - 5 дм3/мин аспирируют через бумажный фильтр, помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации пиридата на уровне предела обнаружения (0,005 мг/м3) необходимо отобрать 100 дм3 воздуха.

Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильнике (4 ± 2) °С - 14 дней. Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру при температуре (-18 ± 2) °С.

8.3. Условия проведения смыва

Смывы проводят в конце работы или после выполнения отдельных операций с открытых и закрытых спецодеждой или другими СИЗ участков тела (лоб, лицо, шея, грудь, предплечье, голень, кисти рук, включая межпальцевые промежутки).

До работы выбирают участок кожи, обрабатывают его для удаления загрязнений, фиксируют площадь (не менее 200 см2). При необходимости отбирают фоновые смывы.

Смыв выполняют способом обмыва фиксированного участка кожи смесью этилового спирта с водой (8:2, по объему), помещая 20 см3 в стеклянную емкостью с металлической крышкой. Тканевой салфеткой, смоченной растворителем, с помощью пинцета (индивидуально) обмывают этот участок сверху вниз. Операцию повторяют дважды.

Срок хранения отобранных проб смывов, помещенных в герметично закрытые емкости, в холодильнике (4 ± 2) °С - 14 дней. Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру при температуре (-18 ± 2) °С.

9. Выполнение измерений

9.1. Воздушная среда

Экспонированный фильтр переносят в химический стакан вместимостью 150 см3, заливают 10 см3 ацетона или ацетонитрила, помещают на встряхиватель на 10 минут. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона или ацетонитрила объемом 10 см3, выдерживая на встряхивателе по 10 минут.

Объединенный экстракт переносят (через воронку) в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха и проводят щелочной гидролиз пиридата согласно п. 9.3.

После гидролиза остаток растворяют в 5 см3 подвижной фазы (подготовленной по п. 7.2), тщательно перемешивают и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.6.

9.2. Смывы с кожных покровов

Пробу смыва сливают (через воронку) в колбу для упаривания, с помощью пинцета извлекают салфетку, помещают в конусную химическую воронку, установленную в муфту колбы для упаривания, тщательно отжимают и промывают этанолом дважды порциями по 10 см3, предварительно ополаскивая этанолом емкость, в которой находилась проба.

Объединенный раствор упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха и проводят щелочной гидролиз пиридата согласно п. 9.3.

После гидролиза остаток растворяют в 2 см3 подвижной фазы (подготовленной по п. 7.2) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.6.

Пробу вводят в испаритель хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика пиридафола, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию пиридафола в хроматографируемом растворе.

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 0,5 мкг/см3, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 50 раз).

9.3. Щелочной гидролиз пиридата до пиридафола

В колбу с сухим остатком вносят 5 см3 ацетонитрила, добавляют 0,5 см3 25 %-го водного раствора аммиака, перемешивают, закрывают пробкой и выдерживают 1 час при комнатной температуре. После этого раствор упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С досуха, остаток растворяют в 5 см3 (п. 9.1) или 2 см3 (п. 9.2) подвижной фазы и анализируют методом ВЭГЖХ в условиях хроматографирования по п. 7.6.

10. Обработка результатов анализа

10.1. Воздушная среда

Концентрацию пиридата в пробе воздуха (X), мг/м3, рассчитывают по формуле:

С - концентрация пиридафола в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;

W - объем раствора, подготовленного для хроматографирования, см3;

K - коэффициент, равный 1,834 - соотношение молекулярных масс пиридата и пиридафола;

Vt - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °С) или нормальным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 0 °С), дм3:

Т - температура воздуха при отборе проб (на входе в аспиратор), °С;

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;

u - расход воздуха при отборе пробы, дм3/мин;

t - длительность отбора пробы, мин;

R - коэффициент, равный 0,386 для воздуха рабочей зоны и 0,357 для атмосферного воздуха.

10.2. Смывы с кожных покровов

Концентрацию пиридата в пробе смыва (X), мкг/смыв, рассчитывают по формуле:

Х = СWK, где

С - концентрация пиридафола в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;

W - объем раствора, подготовленного для хроматографирования, см3;

K - коэффициент, равный 1,834 - соотношение молекулярных масс пиридата и пиридафола.

Примечание. Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

11. Оформление результатов измерений

Результат количественного анализа представляют в виде: результат анализа  в мг/м3 или мкг/смыв (с указанием площади смыва в см2), характеристика погрешности δ, % (таблица), Р = 0,95 или

 ± Δ мг/м3 (мкг/смыв, площадь смыва, см2), Р = 0,95, где

 - среднее арифметическое результатов определений, мг/м3 (мкг/смыв);

Δ - граница абсолютной погрешности, мг/м3 (мкг/смыв):

δ - граница относительной погрешности методики (показатель точности по диапазону концентраций, таблица), %.

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание пиридата в пробе воздуха рабочей зоны - менее 0,05 мг/м3; в пробе атмосферного воздуха- менее 0,005 мг/м3; в пробе смыва - менее 0,2 мкг/смыв»*.

* 0,05 мг/м3; 0,005 мг/м3; 0,2 мкг/смыв - пределы обнаружения при отборе 10 дм3 воздуха рабочей зоны; при отборе 100 дм3 атмосферного воздуха; в пробе смыва (фиксированная площадь смыва, 200 см2) соответственно.

12. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6)-02 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

12.1. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее трех образцов растворов для градуировки, содержание пиридафола в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,05 до 0,5 мкг/см3.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

X - концентрация пиридафола в пробе при контрольном измерении, мкг/см3;

С - известная концентрация градуировочного раствора пиридафола, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;

В - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (В = 10 % при Р = 0,95).

Если величина расхождения (А) превышает 10 %, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов пиридафола, предусмотренных МВИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново согласно п. 7.5.

Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

12.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздушной среды и смывов с кожных покровов. Объем отобранных для контроля процедуры выполнения анализа проб воздуха и смывов с кожи должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике, фиксированная площадь смыва должна быть увеличена в 2 раза. После отбора проб экстракт с фильтра, а также пробу смыва делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы - X. Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента (величина добавки Сд должна соответствовать 50 - 150 % от содержания компонента в пробе, общая концентрация не должна превышать верхнюю границу диапазона измерения) и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы с добавкой - X′. Результаты анализа исходной рабочей пробы (X′) и рабочей пробы с добавкой (X) получают в условиях повторяемости (один аналитик, использование одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.).

Величина добавки Сд должна удовлетворять условию:

 - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой), мг/м3, мкг/смыв.

Допустимо характеристику погрешности результатов анализа при внедрении методики в лаборатории устанавливать с последующим уточнением по мере накопления информации на основе выражения:

Δл = ± 0,84Δ, где

Δ - граница абсолютной погрешности, мг/м3, мкг/смыв:

δ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица), %.

Контроль проводят путем сравнения результата контрольной процедуры Кк с нормативом контроля К.

Результат контрольной процедуры Кк рассчитывают по формуле:

, , Сд - среднее значение массовой концентрации анализируемого компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно (мг/м3, мкг/смыв).

Норматив оперативного контроля точности К рассчитывают по формуле:

Проводят сопоставление результата контрольной процедуры (Кк) с нормативом контроля (К).

Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию

|Кк| ≤ К,

(1)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (1) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (1) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

12.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

|Х1 - Х2| ≤ R, где

(2)

R - предел воспроизводимости (таблица), мг/м3, мкг/смыв.

R = 0,11 (воздух рабочей зоны, атмосферный воздух),

R = 0,18 (смывы с кожи), где

 = ½( Х1 + Х2), где X1, Х2 - результаты измерений в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/м3, мкг/смыв;

Если выполняется условие (2), то воспроизводимость измерений считается удовлетворительной.

При превышении норматива контроля воспроизводимости эксперимент повторяют, при повторном превышении указанного норматива выясняют причины и по возможности их устраняют.

92
Мне нравится
Комментировать Добавить в закладки

Комментарии могут оставлять только зарегистрированные пользователи.

Пожалуйста зарегистрируйтесь или авторизуйтесь на сайте.