На главную
На главную

Определение остаточных количеств циантранилипрола в воде, почве, капусте, плодах томата и томатном соке, в луке-пере и луке-репке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовых концентраций циантранилипрода в воде в диапазоне 0,005 — 0,05 мг/дм3 и в почве в диапазоне 0,01 — 0,1 мг/кг, а также уровня его остаточных количеств в капусте, в плодах томата и томатном соке, в луке-репке и зеленом луке в диапазоне 0,01— 0,1 мг/кг.

Обозначение: МУК 4.1.3207-14
Название рус.: Определение остаточных количеств циантранилипрола в воде, почве, капусте, плодах томата и томатном соке, в луке-пере и луке-репке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Статус: введен впервые
Дата актуализации текста: 05.05.2017
Дата добавления в базу: 12.02.2016
Дата введения в действие: 30.07.2014
Утвержден: 30.07.2014 Главный государственный санитарный врач Российской Федерации
Опубликован: Роспотребнадзор (2015 г. )
Ссылки для скачивания:

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование
Российской Федерации

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение
остаточных количеств циантранилипрола
в воде, почве, капусте, плодах томата
и томатном соке, в луке-пере и луке-репке
методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии

Методические указания
МУК 4.1.3207-14

Москва 2015

1. Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России (В.А. Калинин, Е.В. Довгилевич, А.В. Довгилевич, Н.В. Устименко).

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол № 1 от 26 июня 2014 г.).

3. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 30 июля 2014 г.

4. Введены впервые.

СОДЕРЖАНИЕ

1. Метрологические характеристики. 4

2. Метод измерений. 4

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы.. 5

3.1. Средства измерений. 5

3.2. Реактивы.. 5

3.3. Вспомогательные устройства и материалы.. 6

4. Требования безопасности. 7

5. Требования к квалификации операторов. 7

6. Условия измерений. 7

7. Подготовка к выполнению определений. 7

7.1. Подготовка органических растворителей. 7

7.2. Приготовление растворов для проведения анализа. 8

7.3. Установление градуировочной характеристики. 9

7.4. Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения циантранилипрола на ней. 9

7.5. Подготовка концентрирующих патронов № 3 для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения циантранилипрола на них. 10

7.6. Подготовка концентрирующих патронов № 1 для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения циантранилипрола на них. 10

7.7. Подготовка концентрирующих патронов № 2 для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения циантранилипрола на них с использованием водно-органических смесей. 11

7.8. Подготовка концентрирующих патронов № 2 для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения циантранилипрола на них с использованием органических растворителей. 12

7.9. Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии. 12

8. Отбор проб и хранение. 12

9. Выполнение определения. 13

9.1. Вода. 13

9.2. Почва. 13

9.3. Лук-репка и плоды томатов. 14

9.4. Лук-перо. 15

9.5. Томатный сок. 15

9.6. Капуста. 16

9.7. Условия хроматографирования. 16

10. Обработка результатов. 17

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений. 17

12. Оформление результатов. 17

13. Контроль качества результатов измерений. 17

13.1. Контроль стабильности градуировочной характеристики. 17

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок. 18

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости. 19

Приложение 1. Полнота извлечения циантранилипрола из воды, почвы, капусты, плодов томата и томатного сока, лука-репки и лука-пера (5 повторностей для каждой концентрации, Р = 0,95) 19

 

 

УТВЕРЖДАЮ

Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия
человека, Главный государственный
санитарный врач Российской Федерации

_______________________ А.Ю. Попова

30 июля 2014 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств
циантранилипрола в воде, почве, капусте, плодах
томата и томатном соке, в луке-пере и луке-репке
методом высокоэффективной жидкостной
хроматографии

Методические указания
МУК 4.1.3207-14

Свидетельство о метрологической аттестации № 01.00282-2008/0169.27.05.13 от 27.05.2013 г.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовых концентраций циантранилипрола в воде в диапазоне 0,005 - 0,05 мг/дм3 и в почве в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг, а также уровня его остаточных количеств в капусте, в плодах томата и томатном соке, в луке-репке и зеленом луке в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Циантранилипрол.

3-бромо-1-(3-хлоро-2-пиридил)-4ʹ-циано-2ʹ-метил-6ʹ-(метилкарбомоил)пиразол-5-карбоксанилид (IUPAC).

Эмпирическая формула: C19H14BrClN6O2.

Молекулярная масса: 473,72.

Агрегатное состояние: порошок.

Цвет, запах: белое кристаллическое вещество без запаха.

Температура плавления: 224 °С.

Давление паров: 5,13×10-15 Па (при 20 °С).

Структурная формула:

Коэффициент распределения октанол-вода (20 °С): KowlogP = 1,97 (при pH 4); 2,02 (при pH 7) 1,74 (при pH 9)

Растворимость в воде, мг/дм3 (20 °С): 17,43 при pH 4; 12,33 при pH 7 и 5,94 при pH 9.

Растворимость в органических растворителях (г/дм3, 20 °С): ацетон - 6,54: ацетонитрил - 2,45; н-гексан - 6,7×10-5; дихлорметан - 5,05; метанол - 4,73; н-октанол - 0,79; этилацетат - 1,96.

В водных растворах период полураспада циантранилипрола (DT50) при 25 °С составляет 212 дней (pH 4), 30,3 дня (pH 7) и 0,85 дня (pH 9).

Краткая токсикологическая характеристика. Циантранилипрол относится к мало опасным веществам по острой пероральной (ЛД50 Для крыс и мышей составляет более 5000 мг/кг) и дермальной (ЛД50 для крыс и мышей составляет более 2000 мг/кг) токсичности, но к умеренно опасным по ингаляционной токсичности (ЛК50 для крыс (4 часа) - более 5200 мг/м3 воздуха). Не вызывает раздражения кожи и глаз у кроликов. Не является мутагеном и канцерогеном. Не является тератогеном и эмбриотоксином для крыс и кроликов, не обладает репродуктивной токсичностью.

Область применения. Циантранилипрол - инсектицид системно-контактного действия, воздействующий на нервную систему насекомых. Усиливает высвобождение кальция из арсеналов путем активации ринидиновых рецепторов. Исчерпание кальциевых арсеналов приводит к ингибированию сокращения мышц. Рекомендуется к применению для борьбы с грызущими и сосущими насекомыми на капусте, луке, томатах.

1. Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

Таблица 1

Метрологические параметры для циантранилипрола

Анализируемый объект

Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3)

Показатель точности (границы относительной погрешности) ±δ, % при Р = 0,95

Стандартное отклонение повторяемости, σr, %

Предел повторяемости, r, %

Предел воспроизводимости, R, %

Вода

0,005 - 0,01 вкл.

40

1,93

5,37

7,51

0,01 - 0,05 вкл.

30

0,65

1,81

2,53

Почва

0,01 - 0,1 вкл.

50

1,83

5,09

7,12

Капуста

0,01 - 0,1 вкл.

50

1,53

4,25

5,96

Плоды томата

0,01 - 0,1 вкл.

50

1,20

3,34

4,67

Томатный сок

0,01 - 0,1 вкл.

50

1,71

4,75

6,66

Лук-репка

0,01 - 0,1 вкл.

50

1,39

3,86

5,41

Лук-перо

0,01 - 0,1 вкл.

50

2,19

6,09

8,52

Таблица 2

Полнота извлечения вещества,
стандартное отклонение, доверительный интервал
среднего результата для циантранилипрола

Анализируемый объест

Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20

Предел обнаружения, мг/кг (мг/дм3)

Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3)

Среднее значение определения, %

Стандартное отклонение, S, %

Доверительный интервал среднего результата, ±, %

Вода

0,005

0,005 - 0,05

96,82

1,90

0,86

Почва

0,01

0,01 - 0,1

73,80

1,51

0,52

Капуста

0,01

0,01 - 0,1

74,70

1,24

0,43

Плоды томатов

0,01

0,01 - 0,1

77,05

2,05

0,74

Томатный сок

0,01

0,01 - 0,1

78,28

1,99

0,73

Лук-репка

0,01

0,01 - 0,1

76,01

1,89

0,67

Лук-перо

0,01

0,01 - 0,1

75,00

1,91

0,67

2. Метод измерений

Метод основан на определении циантранилипрола с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами, на колонках с окисью алюминия и на концентрирующих патронах № 1, 2 и 3.

Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные
устройства и материалы

3.1. Средства измерений

Весы аналитические класса точности - специальный (I), с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г

ГОСТ Р 53228-2008

Весы лабораторные общего назначения класса точности - средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности ±0,038 г

ГОСТ Р 53228-2008

Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1000 см3

ГОСТ 1770-74

Микрошприц объемом 100 мм3 со шкалой деления 0,001 см3 и погрешностью менее 1 % от номинального объема

 

Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см3

ГОСТ 29227-91

рН-метр/милливольтметр с диапазоном измерения 0 … 14 pH; ±1999 мВ

 

Хроматографическая система, включающая:

- хроматограф жидкостный, снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от 15 до 80 °С, с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу;

- компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ

 

Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 см3

ГОСТ 1770-74

Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Циантранилипрол, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,2 %.

CAS 736994-63-1

Алюминия окись для хроматографии, ч

ТУ 6-09-3916-75

Ацетон, осч

ТУ 6-09-3513-86

Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм

ТУ 6-09-2167-84

Вода дистиллированная и (или) бидистиллированная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости)

ГОСТ 6709-72

Гелий, очищенный

ТУ-51-940-80

n-Гексан, хч

ТУ 6-09-3818-89

Калий марганцово-кислый, чда

ГОСТ 20490-75

Кальций хлористый, ч

ТУ 6-09-4711-81

Кислота муравьиная, чда

ГОСТ 5848-73

Кислота уксусная, ледяная

ГОСТ 61-75

Концентрирующие патроны для твердофазной экстракции с гидрофобным сорбентом с размером частиц 63 - 200 мкм с привитыми октальными (С8) группами (объем - 1 см3, масса сорбента - 0,6 г), патрон № 1

ТУ 4215-002-05451931-94

Концентрирующие патроны для твердофазной экстракции со слабоосновным сорбентом с размером частиц 63 - 200 мкм с привитыми аминогруппами (объем - 1 см3, масса сорбента - 0,6 г), патрон № 2

ТУ 4215-002-05451931-94

Концентрирующие патроны для твердофазной экстракции с гидрофильным слабокислым сорбентом с постоянной активностью с размером частиц 63 - 200 мкм (С) (объем - 1 см3, масса сорбента - 0,6 г), патрон № 3

ТУ 4215-002-05451931-94

Метилен хлористый, хч

ТУ 2631-019-44493179-98

Натрий серно-кислый, безводный, хч

ГОСТ 4166-76

Натрий хлористый, хч

ГОСТ 4233-77

Примечание. Допускается использование реактивов с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы

Алонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами

ГОСТ 25336-82

Аппарат для встряхивания проб с возвратно - поступательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту

 

Банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см3

 

Ванна ультразвуковая с потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 дм3

 

Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная

ГОСТ 5556-81

Воронки делительные на 250 см3

ГОСТ 25336-82

Воронки лабораторные, стеклянные

ГОСТ 25336-82

Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3000 см3, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об./мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм3 и с диапазоном температур от 20 до 100 °С

 

Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1000 см3

ГОСТ 25336-82

Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100, 250 и 4000 см3 ТС

ТУ 92-891.029-91

Колонка хроматографическая стальная, длиной 250 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами С18

 

Насос диафрагменный, химически стойкий на 100 %, с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс., с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм3/мин

 

Предколонка хроматографическая стальная, длиной 20,0 мм, внутренним диаметром 3,9 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами С8

 

Стаканы стеклянные, термостойкие объемом 100 - 500 см3

ГОСТ 25336-82

Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4000 см3 и приемной конической колбой объемом 1000 см3

 

Фильтры бумажные, низкой плотности

ТУ-6-09-1678-86

Фильтры для очистки растворителей, диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм

 

Центрифуга лабораторная, настольная, с максимальным рабочим числом оборотов 4000 об./мин, с рабочим объемом ротора 200 см3×4 ячейки, выбираемый временной диапазон работы от 0 до 100 мин и с набором полипропиленовых банок емкостью 200 см3

 

Шприц инъекционный многократного применения объемом 10 см3

ГОСТ 22967-90

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-2009, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-91.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С, относительной влажности не более 80 % и нормальном атмосферном давлении;

- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению определений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с окисью алюминия для очистки экстракта, подготовка концентрирующих патронов № 1, 2 и 3 для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с окисью алюминия и концентрирующих патронах № 1, 2 и 3, установление градуировочной характеристики.

7.1. Подготовка органических растворителей

7.1.1. Очистка ацетонитрила.

Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 часов. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 аппарата для перегонки растворителей.

Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °С, отбрасывают.

7.1.2. Очистка ацетона.

Ацетон, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 часов. Затем ацетон сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 аппарата для перегонки растворителей, прибавляют туда марганцово-кислый калий из расчета 100 мг/дм3. Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °С, отбрасывают.

7.1.3. Приготовление бидистиллированной воды.

Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к ней марганцово-кислый калий из расчета 1 г/дм3 и кипятят в течение 6 часов.

Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °С, отбрасывают.

7.2. Приготовление растворов для проведения анализа

7.2.1. Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ.

Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанные ацетонитрил и воду.

В плоскодонную колбу объемом 1 дм3 помешают 450 см3 ацетонитрила, 500 см3 очищенной воды и 1 см3 муравьиной кислоты. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 см3/мин в течение 5 мин, после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 мин.

7.2.2. Приготовление смеси для растворения проб.

В плоскодонную колбу объемом 100 см3 помещают 70 см3 ацетонитрила и 30 см3 очищенной воды. Смесь тщательно перемешивают и используют для растворения проб и приготовления градуировочных растворов.

7.2.3. Приготовление градуировочных растворов.

7.2.3.1. Стандартный раствор № 1 с концентрацией циантранилипрола 100,0 мкг/см3.

Взвешивают 10 мг циантранилипрола в мерной колбе объемом 100 см3. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор № 1 используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 1 хранится в холодильнике не более 2-х месяцев.

7.2.3.2. Стандартный раствор № 2 с концентрацией циантранилипрола 10,0 мкг/см3

Из стандартного раствора № 1 отбирают пипеткой 5 см3, помещают в мерную колбу объемом 50 см3 и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор № 2 используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 2 хранится в холодильнике не более 2-х месяцев.

7.2.3.3. Стандартный раствор № 3 с концентрацией циантранилипрола 1,0 мкг/см3.

Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 7:3. Стандартный раствор № 3 используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор хранят в холодильнике не более 2-х месяцев.

7.2.3.4. Стандартный раствор № 4 с концентрацией циантранилипрола 0,5 мкг/см3.

Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 5 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 7:3. Стандартный раствор № 4 используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор хранят в холодильнике не более 2-х месяцев.

7.2.3.5. Стандартный раствор № 5 с концентрацией циантранилипрола 0,2 мкг/см3.

Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 50 см3 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 7:3. Стандартный раствор № 5 используется для приготовления стандартных растворов и для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор хранят в холодильнике не более 2-х месяцев.

7.2.3.6. Стандартный раствор № 6 с концентрацией циантранилипрола 0,1 мкг/см3.

Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 100 см3 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 7:3. Стандартный раствор № 6 используется для приготовления стандартных растворов и для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор хранят в холодильнике не более 2-х месяцев.

7.2.3.7. Стандартные растворы циантранилипрола в ацетонитриле с концентрациями 2,0; 1,0; 0,4 и 0,2 мкг/см3 для внесения в образцы.

Из стандартного раствора № 2 методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 2,0; 1,0; 0,4 и 0,2 мкг/см3 и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы. Стандартные растворы для внесения хранят в холодильнике не более 2-х месяцев.

7.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации циантранилипрола в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см3.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.7. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.

7.4. Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки
экстракта и проверка хроматографического поведения
циантранилипрола на ней

7.4.1. Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки экстракта.

В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 3 г окиси алюминия с зернением 40/250 меш. и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. Непосредственно перед использованием колонку промывают 10 см3 ацетонитрила.

7.4.2. Проверка хроматографического поведения циантранилипрола на колонке с окисью алюминия.

В концентратор объемом 100 см3 вносят 1 см3 стандартного раствора циантранилипрола в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/см3 и выпаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 10 см3 ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора и наносят на подготовленную колонку. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.

Исходный концентратор последовательно обмывают 10 см3 ацетонитрила, затем двумя порциями по 10 см3 каждая 0,1 %-го раствора уксусной кислоты в ацетонитриле и тремя порциями по 10 см3 0,5 %-го раствора уксусной кислоты в ацетонитриле. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы объемом по 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.

Определяют фракции, содержащие циантранилипрол, полноту смывания с колонки и необходимый объём элюента.

Изучение поведения циантранилипрола на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии окиси алюминия.

7.5. Подготовка концентрирующих патронов № 3 для очистки
экстракта и проверка хроматографического поведения
циантранилипрола на них

7.5.1. Подготовка концентрирующих патронов № 3 для очистки экстракта.

Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин (1 - 2 кап./с).

Патрон № 3 устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см3 (используют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают последовательно 5 см3 ацетона и 5 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1. Элюаты отбрасывают.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

7.5.2. Проверка хроматографического поведения циантранилипрола на концентрирующем патроне № 3.

Из стандартного раствора циантранилипрола в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/см3, отбирают 1 см3, помещают в концентратор объемом 100 см3 и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 см3 ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 8 см3 гексана, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.

Исходный концентратор обмывают 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 2:1. Элюат собирают в концентратор объемом 100 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.

Определяют фракции, содержащие циантранилипрол, полноту смывания с патрона и необходимый объём элюента.

Изучение поведения циантранилипрола на концентрирующих патронах № 3 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии концентрирующих патронов.

7.6. Подготовка концентрирующих патронов № 1
для очистки экстракта и проверка хроматографического
поведения циантранилипрола на них

7.6.1. Подготовка концентрирующих патронов № 1 для очистки экстракта.

Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин (1 - 2 кап./с).

Патрон № 1 устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см3 (используют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают последовательно 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1. Элюаты отбрасывают.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

7.6.2. Проверка хроматографического поведения циантранилипрола на концентрирующем патроне № 1.

Из стандартного раствора циантранилипрола в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/см3, отбирают 1 см3, помещают в концентратор объемом 100 см3 и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1 см3 ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 см3 воды, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.

Исходный концентратор обмывают последовательно 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:9, 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:5 и 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом 100 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.

Определяют фракции, содержащие циантранилипрол, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.

Изучение поведения циантранилипрола на концентрирующих патронах № 1 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии концентрирующих патронов.

7.7. Подготовка концентрирующих патронов № 2
для очистки экстракта и проверка хроматографического
поведения циантранилипрола на них с использованием
водно-органических смесей

7.7.1. Подготовка концентрирующих патронов № 2 для очистки экстракта.

Все процедуры происходите использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин (1 - 2 кап./с).

Патрон № 2 устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см3 (используют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:5. Элюат отбрасывают.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

7.7.2. Проверка хроматографического поведения циантранилипрола на концентрирующем патроне № 2.

Из стандартного раствора циантранилипрола в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/см3, отбирают 1 см3, помещают в концентратор объемом 100 см3 и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1 см3 ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 5 см3 воды, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.

Исходный концентратор обмывают последовательно двумя порциями по 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:5. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом 100 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.

Определяют фракции, содержащие циантранилипрол, полноту смывания с патрона и необходимый объём элюента.

Изучение поведения циантранилипрола на концентрирующих патронах № 2 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии концентрирующих патронов.

7.8. Подготовка концентрирующих патронов № 2
для очистки экстракта и проверка хроматографического
поведения циантранилипрола на них с использованием
органических растворителей

7.8.1. Подготовка концентрирующих патронов № 2 для очистки экстракта.

Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин (1 - 2 кап./с).

Патрон № 2 устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см3 (используют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 см3 гексана. Элюат отбрасывают.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

7.8.2. Проверка хроматографического поведения циантранилипрола на концентрирующем патроне № 2.

Из стандартного раствора циантранилипрола в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/см3, отбирают 1 см3, помещают в концентратор объемом 100 см3 и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 5 см3 хлористого метилена, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 5 см3 гексана, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.

Исходный концентратор обмывают последовательно 20 см3 смеси гексана с хлористым метиленом в соотношении 1:1, 20 см3 смеси гексана с хлористым метиленом в соотношении 1:2, 20 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:1. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом 100 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.

Определяют фракции, содержащие циантранилипрол, полноту смывания с патрона и необходимый объём элюента.

Изучение поведения циантранилипрола на концентрирующих патронах № 2 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии концентрирующих патронов.

7.9. Подготовка и кондиционирование
колонки для жидкостной хроматографии

Хроматографическую колонку с предколонкой устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 30 °С и скорости потока подвижной фазы 1 см3/мин 3 - 4 ч.

8. Отбор проб и хранение

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», № 2051-79 от 21.08.79, а также в соответствии с ГОСТ Р 51592-2000 «Вода. Общие требования к отбору проб», ГОСТ 17.4.3.01-83 «Почвы. Общие требования к отбору проб», ГОСТ 28168-89 «Почвы. Отбор проб», ГОСТ Р 51810-2001 «Томаты свежие, реализуемые в розничной торговой сети» и ГОСТ Р 52183-2003 «Консервы. Соки овощные. Сок томатный. ТУ», ГОСТ Р 51783-2001 «Лук репчатый свежий, реализуемый в розничной торговой сети. ТУ», ГОСТ Р 51809-2001 «Капуста белокочанная свежая, реализуемая в розничной торговой сети», ГОСТ 1724-85 «Капуста белокочанная свежая, заготовляемая и поставляемая. ТУ».

Пробы воды и томатного сока хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °С не более 10 суток.

Для длительного хранения проб почвы почву подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в темной таре в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.

Пробы томатов, лука и капусты хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре 0 - 4 °С не более суток. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в полиэтиленовой таре в морозильнике при температуре (-18) °С до двух лет.

9. Выполнение определения

9.1. Вода

9.1.1. Экстракция.

Пробу воды объемом 100 см3 помещают в делительную воронку объемом 250 см3. Циантранилипрол экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом по 30 см3, встряхивая каждый разделительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (хлористый метилен) объединяют в концентраторе объемом 250 см3, собирая его через слой безводного сульфата натрия. Объединенный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

Сухой остаток растворяют в 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.

9.2. Почва

9.2.1. Экстракция и очистка полученного экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.

Образец почвы массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 см3, прибавляют 75 см3 ацетонитрила и помещают на 5 мин в ультразвуковую ванну. Затем пробу центрифугируют в течение 4 мин при скорости 4000 об./мин. Супернатант фильтруют через фильтр низкой плотности в колбу объемом 250 см3 с 10 г сухого хлористого натрия. Экстракцию повторяют еще два раза в тех же условиях, используя по 50 см3 ацетонитрила. Ацетонитрильные экстракты объединяют в колбе объемом 250 см3 с 10 г сухого хлористого натрия, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 10 мин.

Объединенный экстракт из колбы переносят в делительную воронку объемом 250 см3 (не растворившуюся соль оставляют в колбе), оставляют до полного разделения слоев и нижний (водный) слой отбрасывают.

К ацетонитрильному экстракту в делительной воронке прибавляют 50 см3 гексана и интенсивно встряхивают 2 мин. После полного разделения фаз отбрасывают выделившийся нижний водный слой и верхний гексановый слой, ацетонитрильный экстракт переносят в химический стакан объемом 200 см3. Затем ацетонитрильный экстракт возвращают в делительную воронку и еще раз промывают 50 см3 гексана в тех же условиях. Верхний слой отбрасывают, а ацетонитрильный экстракт собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 см3, осушитель обмывают 10 см3 ацетинитрила, смыв объединяют с основным экстрактом и объединенный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

9.2.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.

К сухому остатку в концентраторе, полученному по п. 9.2.1, прибавляют 3 см3 ацетона, обмывают стенки колбы, прибавляют 50 см3 дистиллированной воды и 10 см3 насыщенного раствора соли, перемешивают и переносят в делительную воронку объемом 250 см3. Экстракт в делительной воронке промывают двумя порциями гексана объемом по 30 см3, интенсивно встряхивая делительную воронку каждый раз по 2 мин. После полного разделения фаз отбрасывают верхний гексановый слой, нижний водный слой возвращают в делительную воронку.

Циантранилипрол экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом по 20 см3, встряхивая делительную воронку каждый раз по 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (хлористый метилен) объединяют в концентраторе объемом 250 см3, пропуская его через слой безводного сульфата натрия, и объединенный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

9.2.3. Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия.

Сухой остаток, полученный в п. 9.2.2, растворяют в 10 см3 ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора и вносят на подготовленную колонку, элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают последовательно 10 см3 ацетонитрила, затем двумя порциями по 10 см3 каждая 0,1 %-го раствора уксусной кислоты в ацетонитриле и вносят на колонку. Элюаты отбрасывают.

Циантранилипрол элюируют 30 см3 0,5 %-го раствора уксусной кислоты в ацетонитриле. Элюат собирают в концентратор объемом 100 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

9.2.4. Очистка экстракта на концентрирующих патронах № 1.

Сухой остаток, полученный в п. 9.2.3., растворяют в 1 см3 ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 см3 воды, перемешивают и вносят на подготовленный патрон. Элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают последовательно 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:9 и 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:5. Элюаты отбрасывают.

Циантранилипрол элюируют 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1. Элюат собирают в концентратор объемом 100 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

9.2.5. Очистка экстракта на концентрирующих патронах № 3.

Сухой остаток, полученный в п. 9.2.3., растворяют в 2 см3 ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 8 см3 гексана, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор объемом 100 см3. Исходный концентратор обмывают 10 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 2:1. Элюаты объединяют и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.

9.3. Лук-репка и плоды томатов

9.3.1. Экстракция и очистка полученного экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.

Образец измельченных плодов томата (или лука-репки) массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 см3, прибавляют 50 см3 ацетонитрила и помещают на 5 мин в ультразвуковую ванну. Ацетонитрильный экстракт фильтруют в плоскодонную колбу объемом 250 см3 с 10 г сухого хлористого натрия. Экстракцию повторяют двумя порциями ацетонитрила объемом по 50 см3 в тех же условиях. Ацетонитрильные экстракты объединяют в колбе объемом 250 см3 с 10 г сухого хлористого натрия, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 10 мин.

Объединенный экстракт из колбы переносят в делительную воронку объемом 250 см3 (не растворившуюся соль оставляют в колбе), оставляют до полного разделения слоев и нижний (водный) слой отбрасывают.

Далее проводят очистку экстракта как указано в п.п. 9.2.2. «Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей», 9.2.3. «Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия», 9.2.4. «Очистка экстракта на концентрирующих патронах № 1» и 9.2.5. «Очистка экстракта на концентрирующих патронах № 3».

Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.

9.4. Лук-перо

9.4.1. Экстракция.

Образец измельченного пера лука массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции, прибавляют 50 см3 ацетонитрила и помещают на 5 мин в ультразвуковую ванну. Далее проводят экстракцию и очистку полученного экстракта как указано в п. 9.3.1. «Экстракция и очистка полученного экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей».

Затем проводя т очистку экстракта как указано в п.п. 9.2.2. «Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей» и 9.2.3. «Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия».

9.4.2. Очистка экстракта на концентрирующих патронах № 2 с использованием водно-органических смесей.

Сухой остаток растворяют в 1 см3 ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 5 см3 воды, перемешивают и вносят на подготовленный патрон. Элюат собирают в концентратор объемом 100 см3. Исходный концентратор обмывают 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:5 и вносят на патрон. Элюаты объединяют и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

Далее проводят очистку экстракта как указано в п. 9.2.5. «Очистка экстракта на концентрирующих патронах № 3».

Сухой остаток, полученный после очистки, растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.

9.5. Томатный сок

9.5.1. Экстракция и очистка полученного экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.

Образец томатного сока массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 см3, прибавляют 100 см3 ацетонитрила и интенсивно встряхивают 2 мин. Затем пробу центрифугируют в течение 4 мин при скорости 4000 об./мин. Супернатант фильтруют через фильтр низкой фильтрации в колбу объемом 250 см3 с 10 г сухого хлористого натрия и оставляют при комнатной температуре на 10 мин.

Объединенный экстракт из колбы переносят в делительную воронку объемом 250 см3 (не растворившуюся соль оставляют в колбе), оставляют до полного разделения слоев и нижний (водный) слой отбрасывают.

Далее проводят очистку экстракта как указано в п.п. 9.2.2. «Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей», 9.2.3. «Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия», 9.2.4. «Очистка экстракта на концентрирующих патронах № 1» и 9.2.5. «Очистка экстракта на концентрирующих патронах № 3».

Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрил-вода в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.

9.6. Капуста

9.6.1. Экстракция.

Образец измельченной капусты массой 20 г помешают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 см3, прибавляют 50 см3 ацетона и помещают на 5 мин в ультразвуковую ванну. Ацетоновый экстракт фильтруют через рыхлый ватный тампон в банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 см3. Экстракцию повторяют двумя порциями ацетона объемом по 50 см3 в тех же условиях. Ацетоновый экстракт объединяют и центрифугируют в течение 4 мин при скорости 4000 об./мин, а затем фильтруют через фильтр «красная лента» в концентратор объемом 250 см3 и осторожно упаривают (вскипает!) порциями по 50 см3 до водного остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

Далее проводят очистку экстракта как указано в п.п. 9.2.2. «Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей», 9.2.3. «Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия» п. 9.2.4. «Очистка экстракта на концентрирующих патронах № 1».

При недостаточной чистоте пробы дополнительно очищают на концентрирующем патроне № 2 по следующей схеме.

9.6.2. Очистка экстракта на концентрирующих патронах № 2 с использованием органических растворителей.

Сухой остаток растворяют в 5 см3 хлористого метилена, прибавляют 5 см3 гексана, перемешивают и вносят на патрон. Элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают последовательно 20 см3 смеси гексана с хлористым метиленом в соотношении 1:1, 20 см3 смеси гексана с хлористым метиленом в соотношении 1:2, элюаты отбрасывают. Циантранилипрол элюируют с патрона 20 см3 смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:1. Элюат собирают в концентратор объемом 100 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.

9.7. Условия хроматографирования

Хроматографическая система, включающая:

- хроматограф жидкостный, снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от 15 до 80 °С, с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу;

- компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ.

Колонка хроматографическая стальная, длиной 250 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами С18.

Предколонка хроматографическая стальная, длиной 20,0 мм, внутренним диаметром 3,9 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами С8.

Температура колонки: 30 °С.

Подвижная фаза: ацетонитрил-вода-муравьиная кислота в соотношении 450:500:1.

Длина волны: 265 нм.

Объем вводимой пробы 20 мм3.

Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2 - 20 нг.

10. Обработка результатов

Содержание циантранилипрола в пробах рассчитывают по формуле:

X - содержание циантранилипрола в пробе, мг/кг или мг/дм3;

Sст. - высота (площадь) пика стандарта, мм;

Sпр. - высота (площадь) пика образца, мм;

А - концентрация стандартного раствора, мкг/см3;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;

m - масса анализируемого образца, г (см3);

Р - содержание циантранилипрола в аналитическом стандарте, %.

11. Проверка приемлемости результатов
параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

(1)

Х1, Х2 - результаты параллельных определений, мг/кг;

r - значение предела повторяемости, % (табл. 1), при этом r = 2,8×σr.

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

 мг/кг при вероятности Р = 0,95, где

 - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

Δ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

δ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг».*

* - 0,01 мг/кг - предел обнаружения.

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений, а также контроль стабильности градуировочной характеристики осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

13.1. Контроль стабильности градуировочной
характеристики

Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

Контроль стабильности градуировочной характеристики для циантранилипрола проводят при смене основных градуировочных растворов № 1, 2, 3, 4, 5 и 6 каждые 2 месяца, а также в начале и при окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее трех образцов концентраций для градуировки, содержание циантранилипрола в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,1 до 1,0 мкг/см3.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

X - концентрация циантранилипрола контрольного измерения, мкг/см3;

С - известная концентрация градуировочного раствора циантранилипрола в смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;

3,23 - погрешность градуировочной характеристики, %.

Если величина расхождения (А) превышает 3,23 %, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов циантранилипрола, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики определяют ее заново согласно п. 7.3.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль
процедуры выполнения анализа проводится методом добавок

Величина добавки Сд должна удовлетворять условию:

 - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

Δл = ±0,84Δ, где

Δ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

δ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

Результат контроля процедуры Кк рассчитывают по формуле:

 - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11), содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки, соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

Проводят сопоставление результата контроля процедуры Кк с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

|Кк| ≤ К,

(2)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений,
полученных в условиях воспроизводимости

Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

(3)

Х1, Х2 - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

Приложение 1

Полнота извлечения циантранилипрола
из воды, почвы, капусты, плодов томата и томатного сока,
лука-репки и лука-пера (5 повторностей для каждой
концентрации, Р = 0,95)

Среда циантранилипрола

Внесено циантранилипрола, мг/кг (мг/дм3)

Обнаружено циантранилипрола, мг/кг (мг/дм3)

Полнота определения, %

1

2

3

4

Вода

0,005

0,0048 ± 0,0001

95,2

0,010

0,0097 ± 0,0002

97,0

0,020

0,0192 ± 0,0002

96,0

0,050

0,0495 ± 0,0004

99,1

Почка

0,01

0,0074 ± 0,0001

74,0

0,02

0,0147 ±0,0003

73,6

0,05

0,0373 ± 0,0003

74,6

0,10

0,0730 ± 0,0017

73,0

Капуста

0,01

0,0074 ± 0,0001

74,0

0,02

0,0149 ± 0,0001

74,6

0,05

0,0375 ± 0,0007

75,0

0,10

0,0748 ± 0,0013

74,8

Плоды томата

0,01

0,0077 ± 0,0001

77,0

0,02

0,0151 ± 0,0002

75,6

0,05

0,0383 ±0,0001

76,5

0,10

0,0794 ± 0,0012

79,4

Томатный сок

0,01

0,0079 ± 0,0002

79,0

0,02

0,0153 ± 0,0002

76,4

0,05

0,0395 ± 0,0006

78,9

0,10

0,0792 ± 0,0015

79,2

Лук-репка

0,01

0,0075 ± 0,0001

75,0

0,02

0,0149 ± 0,0001

74,3

0,05

0,0385 ± 0,0005

77,0

0,10

0,0773 ± 0,0013

77,3

Лук-перо

0,01

0,0075 ± 0,0002

75,0

0,02

0,0151 ± 0,0001

75,3

0,05

0,0368 ± 0,0009

73,5

0,10

0,0760 ± 0,0009

76,0

 

103
Мне нравится
Комментировать Добавить в закладки

Комментарии могут оставлять только зарегистрированные пользователи.

Пожалуйста зарегистрируйтесь или авторизуйтесь на сайте.