Государственное санитарно-эпидемиологическое
нормирование
Российской Федерации
4.1.
МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение
остаточных количеств циантранилипрола
в воде, почве, капусте, плодах томата
и томатном соке, в луке-пере и луке-репке
методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии
Методические
указания
МУК 4.1.3207-14
Москва
2015
1. Разработаны Российским государственным аграрным
университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр
«Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России (В.А. Калинин,
Е.В. Довгилевич, А.В. Довгилевич, Н.В. Устименко).
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному
санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в
сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол № 1 от 26 июня
2014 г.).
3. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в
сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным
санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 30 июля 2014 г.
4. Введены впервые.
СОДЕРЖАНИЕ
УТВЕРЖДАЮ
Руководитель
Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия
человека, Главный государственный
санитарный врач Российской Федерации
_______________________
А.Ю. Попова
30 июля
2014 г.
|
4.1.
МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств
циантранилипрола в воде, почве, капусте, плодах
томата и томатном соке, в луке-пере и луке-репке
методом высокоэффективной жидкостной
хроматографии
Методические указания
МУК 4.1.3207-14
Свидетельство о метрологической
аттестации № 01.00282-2008/0169.27.05.13 от 27.05.2013 г.
Настоящие методические указания устанавливают порядок
применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения
массовых концентраций циантранилипрола в воде в диапазоне 0,005 - 0,05 мг/дм3
и в почве в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг, а также уровня его остаточных количеств
в капусте, в плодах томата и томатном соке, в луке-репке и зеленом луке в
диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг.
Методические указания носят рекомендательный характер.
Циантранилипрол.
3-бромо-1-(3-хлоро-2-пиридил)-4ʹ-циано-2ʹ-метил-6ʹ-(метилкарбомоил)пиразол-5-карбоксанилид
(IUPAC).
Эмпирическая формула: C19H14BrClN6O2.
Молекулярная масса: 473,72.
Агрегатное состояние: порошок.
Цвет, запах: белое кристаллическое вещество без
запаха.
Температура плавления: 224 °С.
Давление паров: 5,13×10-15 Па (при
20 °С).
Структурная формула:

Коэффициент распределения октанол-вода (20 °С): KowlogP = 1,97 (при pH 4); 2,02 (при pH 7) 1,74 (при pH
9)
Растворимость в воде, мг/дм3 (20 °С):
17,43 при pH 4; 12,33 при pH 7 и 5,94 при pH 9.
Растворимость в органических растворителях (г/дм3,
20 °С): ацетон - 6,54: ацетонитрил - 2,45; н-гексан - 6,7×10-5;
дихлорметан - 5,05; метанол - 4,73; н-октанол - 0,79; этилацетат - 1,96.
В водных растворах период полураспада циантранилипрола (DT50)
при 25 °С составляет 212 дней (pH 4), 30,3 дня (pH 7) и 0,85 дня (pH 9).
Краткая токсикологическая характеристика.
Циантранилипрол относится к мало опасным веществам по острой пероральной (ЛД50
Для крыс и мышей составляет более 5000 мг/кг) и дермальной (ЛД50 для
крыс и мышей составляет более 2000 мг/кг) токсичности, но к умеренно опасным по
ингаляционной токсичности (ЛК50 для крыс (4 часа) - более 5200 мг/м3
воздуха). Не вызывает раздражения кожи и глаз у кроликов. Не является мутагеном
и канцерогеном. Не является тератогеном и эмбриотоксином для крыс и кроликов,
не обладает репродуктивной токсичностью.
Область применения. Циантранилипрол - инсектицид
системно-контактного действия, воздействующий на нервную систему насекомых.
Усиливает высвобождение кальция из арсеналов путем активации ринидиновых
рецепторов. Исчерпание кальциевых арсеналов приводит к ингибированию сокращения
мышц. Рекомендуется к применению для борьбы с грызущими и сосущими насекомыми
на капусте, луке, томатах.
При соблюдении всех регламентированных условий проведения
анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее
составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не
превышает значений, приведенных в табл. 1
для соответствующих диапазонов концентраций.
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение,
доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций
(n = 20) приведены в табл. 2.
Таблица 1
Метрологические параметры для циантранилипрола
Анализируемый
объект
|
Диапазон
определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3)
|
Показатель
точности (границы относительной погрешности) ±δ, % при Р = 0,95
|
Стандартное
отклонение повторяемости, σr, %
|
Предел
повторяемости, r, %
|
Предел воспроизводимости, R,
%
|
Вода
|
0,005
- 0,01 вкл.
|
40
|
1,93
|
5,37
|
7,51
|
0,01
- 0,05 вкл.
|
30
|
0,65
|
1,81
|
2,53
|
Почва
|
0,01
- 0,1 вкл.
|
50
|
1,83
|
5,09
|
7,12
|
Капуста
|
0,01
- 0,1 вкл.
|
50
|
1,53
|
4,25
|
5,96
|
Плоды томата
|
0,01
- 0,1 вкл.
|
50
|
1,20
|
3,34
|
4,67
|
Томатный сок
|
0,01
- 0,1 вкл.
|
50
|
1,71
|
4,75
|
6,66
|
Лук-репка
|
0,01
- 0,1 вкл.
|
50
|
1,39
|
3,86
|
5,41
|
Лук-перо
|
0,01
- 0,1 вкл.
|
50
|
2,19
|
6,09
|
8,52
|
Таблица 2
Полнота извлечения вещества,
стандартное отклонение, доверительный интервал
среднего результата для циантранилипрола
Анализируемый объест
|
Метрологические
параметры, Р = 0,95, n = 20
|
Предел
обнаружения, мг/кг (мг/дм3)
|
Диапазон
определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3)
|
Среднее
значение определения, %
|
Стандартное
отклонение, S, %
|
Доверительный
интервал среднего результата, ±, %
|
Вода
|
0,005
|
0,005
- 0,05
|
96,82
|
1,90
|
0,86
|
Почва
|
0,01
|
0,01 - 0,1
|
73,80
|
1,51
|
0,52
|
Капуста
|
0,01
|
0,01
- 0,1
|
74,70
|
1,24
|
0,43
|
Плоды томатов
|
0,01
|
0,01 - 0,1
|
77,05
|
2,05
|
0,74
|
Томатный сок
|
0,01
|
0,01
- 0,1
|
78,28
|
1,99
|
0,73
|
Лук-репка
|
0,01
|
0,01
- 0,1
|
76,01
|
1,89
|
0,67
|
Лук-перо
|
0,01
|
0,01 - 0,1
|
75,00
|
1,91
|
0,67
|
Метод основан на определении циантранилипрола с помощью высокоэффективной
жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора
после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта
перераспределением между двумя несмешивающимися фазами, на колонках с окисью
алюминия и на концентрирующих патронах № 1, 2 и 3.
Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а
количественное определение - методом абсолютной калибровки.
В предлагаемых условиях анализа метод специфичен.
Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок
различной полярности.
3.1.
Средства измерений
Весы аналитические класса точности
- специальный (I), с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью
0,0001 г
|
ГОСТ
Р 53228-2008
|
Весы лабораторные общего назначения
класса точности - средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и
пределом допустимой погрешности ±0,038 г
|
ГОСТ
Р 53228-2008
|
Колбы мерные на 10, 25, 50, 100,
500 и 1000 см3
|
ГОСТ
1770-74
|
Микрошприц объемом 100 мм3
со шкалой деления 0,001 см3 и погрешностью менее 1 % от
номинального объема
|
|
Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см3
|
ГОСТ
29227-91
|
рН-метр/милливольтметр с
диапазоном измерения 0 … 14 pH; ±1999 мВ
|
|
Хроматографическая система,
включающая:
- хроматограф жидкостный,
снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от 15 до 80 °С, с
ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не
ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу;
- компьютерное программное
обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и
хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа,
обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и
количественный анализ
|
|
Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 см3
|
ГОСТ
1770-74
|
Примечание. Допускается использование средств измерений с
аналогичными или лучшими характеристиками.
Циантранилипрол, аналитический
стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,2 %.
|
CAS 736994-63-1
|
Алюминия окись для хроматографии,
ч
|
ТУ 6-09-3916-75
|
Ацетон, осч
|
ТУ 6-09-3513-86
|
Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм
|
ТУ 6-09-2167-84
|
Вода дистиллированная и (или)
бидистиллированная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной
емкости)
|
ГОСТ 6709-72
|
Гелий, очищенный
|
ТУ-51-940-80
|
n-Гексан, хч
|
ТУ 6-09-3818-89
|
Калий марганцово-кислый, чда
|
ГОСТ
20490-75
|
Кальций хлористый, ч
|
ТУ 6-09-4711-81
|
Кислота муравьиная, чда
|
ГОСТ
5848-73
|
Кислота уксусная, ледяная
|
ГОСТ 61-75
|
Концентрирующие патроны для твердофазной
экстракции с гидрофобным сорбентом с размером частиц 63 - 200 мкм с привитыми
октальными (С8) группами (объем - 1 см3, масса сорбента - 0,6 г), патрон
№ 1
|
ТУ 4215-002-05451931-94
|
Концентрирующие патроны для
твердофазной экстракции со слабоосновным сорбентом с размером частиц 63 - 200
мкм с привитыми аминогруппами (объем - 1 см3, масса сорбента - 0,6
г), патрон № 2
|
ТУ 4215-002-05451931-94
|
Концентрирующие патроны для твердофазной
экстракции с гидрофильным слабокислым сорбентом с постоянной активностью с
размером частиц 63 - 200 мкм (С) (объем - 1 см3, масса сорбента -
0,6 г), патрон № 3
|
ТУ 4215-002-05451931-94
|
Метилен хлористый, хч
|
ТУ 2631-019-44493179-98
|
Натрий серно-кислый, безводный, хч
|
ГОСТ
4166-76
|
Натрий хлористый, хч
|
ГОСТ
4233-77
|
Примечание. Допускается использование реактивов с аналогичными
или лучшими характеристиками.
Алонж прямой с отводом для вакуума
для работы с концентрирующими патронами
|
ГОСТ
25336-82
|
Аппарат для встряхивания проб с
возвратно - поступательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой
10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в
минуту
|
|
Банки полипропиленовые с крышками
для экстракции вместимостью 250 см3
|
|
Ванна ультразвуковая с
потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 дм3
|
|
Вата медицинская гигроскопическая
хлопковая нестерильная
|
ГОСТ
5556-81
|
Воронки делительные на 250 см3
|
ГОСТ
25336-82
|
Воронки лабораторные, стеклянные
|
ГОСТ
25336-82
|
Испаритель ротационный вакуумный с
ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы
от 50 до 3000 см3, с изменяемой скоростью вращения штока
испарителя от 5 до 240 об./мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием
объемом 5 дм3 и с диапазоном температур от 20 до 100 °С
|
|
Колбы конические плоскодонные на
100, 250 и 1000 см3
|
ГОСТ
25336-82
|
Колбы круглодонные со шлифом
(концентраторы) на 100, 250 и 4000 см3 ТС
|
ТУ 92-891.029-91
|
Колонка хроматографическая
стальная, длиной 250 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 5 мкм, заполненная
сорбентом с привитыми полярными группами С18
|
|
Насос диафрагменный, химически
стойкий на 100 %, с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100
мбар/абс., с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм3/мин
|
|
Предколонка хроматографическая
стальная, длиной 20,0 мм, внутренним диаметром 3,9 мм, зернением 5 мкм,
заполненная сорбентом с привитыми полярными группами С8
|
|
Стаканы стеклянные, термостойкие
объемом 100 - 500 см3
|
ГОСТ
25336-82
|
Установка для перегонки
растворителей с круглодонной колбой объемом 4000 см3 и приемной
конической колбой объемом 1000 см3
|
|
Фильтры бумажные, низкой плотности
|
ТУ-6-09-1678-86
|
Фильтры для очистки растворителей,
диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм
|
|
Центрифуга лабораторная,
настольная, с максимальным рабочим числом оборотов 4000 об./мин, с рабочим объемом
ротора 200 см3×4 ячейки, выбираемый временной диапазон
работы от 0 до 100 мин и с набором полипропиленовых банок емкостью 200 см3
|
|
Шприц инъекционный многократного
применения объемом 10 см3
|
ГОСТ
22967-90
|
Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными
или лучшими техническими характеристиками.
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать
требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ
12.1.007-76, требования электробезопасности при работе с электроустановками
по ГОСТ
Р 12.1.019-2009, а также требования, изложенные в технической документации
на газовый хроматограф.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям
пожаробезопасности по ГОСТ
12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ
12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм,
установленных ГН
2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в
воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ
12.0.004-91.
К выполнению измерений и обработке их результатов
допускаются специалисты, имеющие опыт работы в химической лаборатории,
прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод
анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении
процедуры контроля погрешности анализа.
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к
анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С, относительной влажности
не более 80 % и нормальном атмосферном давлении;
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в
условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка
растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование
хроматографической колонки, подготовка колонок с окисью алюминия для очистки
экстракта, подготовка концентрирующих патронов № 1, 2 и 3 для очистки
экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с окисью
алюминия и концентрирующих патронах № 1, 2 и 3, установление градуировочной
характеристики.
7.1.1. Очистка ацетонитрила.
Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают,
добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее
100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 часов.
Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом
4000 см3 аппарата для перегонки растворителей.
Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °С, а фракции,
отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °С, отбрасывают.
7.1.2. Очистка ацетона.
Ацетон, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в
него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3.
Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 часов. Затем ацетон сливают с
осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см3 аппарата
для перегонки растворителей, прибавляют туда марганцово-кислый калий из расчета
100 мг/дм3. Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °С, а фракции,
отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °С, отбрасывают.
7.1.3. Приготовление бидистиллированной воды.
Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом
объемом 4000 см3 от аппарата для перегонки растворителей, добавляют
к ней марганцово-кислый калий из расчета 1 г/дм3 и кипятят в течение
6 часов.
Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °С, а
фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °С, отбрасывают.
7.2.1. Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ.
Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанные
ацетонитрил и воду.
В плоскодонную колбу объемом 1 дм3 помешают 450
см3 ацетонитрила, 500 см3 очищенной воды и 1 см3
муравьиной кислоты. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее
газообразный гелий со скоростью 20 см3/мин в течение 5 мин, после
чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 мин.
7.2.2. Приготовление смеси для растворения проб.
В плоскодонную колбу объемом 100 см3 помещают 70
см3 ацетонитрила и 30 см3 очищенной воды. Смесь тщательно
перемешивают и используют для растворения проб и приготовления градуировочных
растворов.
7.2.3. Приготовление градуировочных растворов.
7.2.3.1. Стандартный раствор № 1 с концентрацией
циантранилипрола 100,0 мкг/см3.
Взвешивают 10 мг циантранилипрола в мерной колбе объемом 100
см3. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки
ацетонитрилом. Стандартный раствор № 1 используется для приготовления
стандартных растворов для установления градуировочной характеристики.
Стандартный раствор № 1 хранится в холодильнике не более 2-х месяцев.
7.2.3.2. Стандартный раствор № 2 с концентрацией циантранилипрола
10,0 мкг/см3
Из стандартного раствора № 1 отбирают пипеткой 5 см3,
помещают в мерную колбу объемом 50 см3 и доводят объем до метки
ацетонитрилом. Стандартный раствор № 2 используется для приготовления
стандартных растворов для установления градуировочной характеристики.
Стандартный раствор № 2 хранится в холодильнике не более 2-х месяцев.
7.2.3.3. Стандартный раствор № 3 с концентрацией
циантранилипрола 1,0 мкг/см3.
Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 см3,
помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки
смесью ацетонитрила с водой в соотношении 7:3. Стандартный раствор № 3
используется для приготовления стандартных растворов для установления
градуировочной характеристики. Стандартный раствор хранят в холодильнике не более
2-х месяцев.
7.2.3.4. Стандартный раствор № 4 с концентрацией
циантранилипрола 0,5 мкг/см3.
Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 5 см3,
помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки
смесью ацетонитрила с водой в соотношении 7:3. Стандартный раствор № 4
используется для приготовления стандартных растворов для установления
градуировочной характеристики. Стандартный раствор хранят в холодильнике не
более 2-х месяцев.
7.2.3.5. Стандартный раствор № 5 с концентрацией
циантранилипрола 0,2 мкг/см3.
Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 см3,
помещают в мерную колбу объемом 50 см3 и доводят объем до метки
смесью ацетонитрила с водой в соотношении 7:3. Стандартный раствор № 5
используется для приготовления стандартных растворов и для установления
градуировочной характеристики. Стандартный раствор хранят в холодильнике не
более 2-х месяцев.
7.2.3.6. Стандартный раствор № 6 с концентрацией
циантранилипрола 0,1 мкг/см3.
Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 см3,
помещают в мерную колбу объемом 100 см3 и доводят объем до метки
смесью ацетонитрила с водой в соотношении 7:3. Стандартный раствор № 6
используется для приготовления стандартных растворов и для установления
градуировочной характеристики. Стандартный раствор хранят в холодильнике не
более 2-х месяцев.
7.2.3.7. Стандартные растворы циантранилипрола в
ацетонитриле с концентрациями 2,0; 1,0; 0,4 и 0,2 мкг/см3 для
внесения в образцы.
Из стандартного раствора № 2 методом последовательного разведения
ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 2,0; 1,0; 0,4 и 0,2 мкг/см3
и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы. Стандартные
растворы для внесения хранят в холодильнике не более 2-х месяцев.
7.3.
Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость
площади (высоты) пика от концентрации циантранилипрола в растворе (мкг/см3),
устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки с
концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см3.
В инжектор хроматографа вводят по 20 мм3 каждого
градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.7.
Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.
7.4.1. Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки
экстракта.
В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм
помещают 3 г окиси алюминия с зернением 40/250 меш. и, аккуратно постукивая по
стенкам колонки, формируют слой адсорбента. Непосредственно перед
использованием колонку промывают 10 см3 ацетонитрила.
7.4.2. Проверка хроматографического поведения циантранилипрола
на колонке с окисью алюминия.
В концентратор объемом 100 см3 вносят 1 см3
стандартного раствора циантранилипрола в ацетонитриле с концентрацией 1,0
мкг/см3 и выпаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе
при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 10 см3
ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора и наносят на
подготовленную колонку. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при
температуре не выше 30 °С.
Исходный концентратор последовательно обмывают 10 см3
ацетонитрила, затем двумя порциями по 10 см3 каждая 0,1 %-го
раствора уксусной кислоты в ацетонитриле и тремя порциями по 10 см3
0,5 %-го раствора уксусной кислоты в ацетонитриле. Каждую порцию собирают
отдельно в концентраторы объемом по 100 см3 и выпаривают досуха на
ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 см3
смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в
хроматограф.
Определяют фракции, содержащие циантранилипрол, полноту
смывания с колонки и необходимый объём элюента.
Изучение поведения циантранилипрола на колонке проводят
каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии окиси алюминия.
7.5.1. Подготовка концентрирующих патронов № 3 для
очистки экстракта.
Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость
потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин (1 - 2
кап./с).
Патрон № 3 устанавливают на алонж с отводом для вакуума,
сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см3
(используют как емкость для элюентов).
Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают последовательно
5 см3 ацетона и 5 см3 смеси гексана с ацетоном в
соотношении 4:1. Элюаты отбрасывают.
Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.
7.5.2. Проверка хроматографического поведения
циантранилипрола на концентрирующем патроне № 3.
Из стандартного раствора циантранилипрола в ацетонитриле,
содержащего 1 мкг/см3, отбирают 1 см3, помещают в
концентратор объемом 100 см3 и упаривают на ротационном вакуумном
испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2
см3 ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 8 см3
гексана, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор и
выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.
Исходный концентратор обмывают 10 см3 смеси
гексана с ацетоном в соотношении 2:1. Элюат собирают в концентратор объемом 100
см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при
температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси
ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в
хроматограф.
Определяют фракции, содержащие циантранилипрол, полноту
смывания с патрона и необходимый объём элюента.
Изучение поведения циантранилипрола на концентрирующих
патронах № 3 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой
партии концентрирующих патронов.
7.6.1. Подготовка концентрирующих патронов № 1 для очистки
экстракта.
Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость
потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин (1 - 2
кап./с).
Патрон № 1 устанавливают на алонж с отводом для вакуума,
сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см3
(используют как емкость для элюентов).
Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают
последовательно 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и
10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1. Элюаты
отбрасывают.
Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.
7.6.2. Проверка хроматографического поведения
циантранилипрола на концентрирующем патроне № 1.
Из стандартного раствора циантранилипрола в ацетонитриле,
содержащего 1 мкг/см3, отбирают 1 см3, помещают в
концентратор объемом 100 см3 и упаривают на ротационном вакуумном
испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1
см3 ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют
9 см3 воды, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в
концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.
Исходный концентратор обмывают последовательно 10 см3
смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:9, 10 см3 смеси
ацетонитрила с водой в соотношении 1:5 и 10 см3 смеси ацетонитрила с
водой в соотношении 1:1. Элюат после прохождения каждой порции элюентов
собирают в отдельные концентраторы объемом 100 см3, упаривают досуха
на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой
остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении
7:3 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.
Определяют фракции, содержащие циантранилипрол, полноту
смывания с патрона и необходимый объем элюента.
Изучение поведения циантранилипрола на концентрирующих
патронах № 1 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой
партии концентрирующих патронов.
7.7.1. Подготовка концентрирующих патронов № 2 для
очистки экстракта.
Все процедуры происходите использованием вакуума, скорость
потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин (1 - 2
кап./с).
Патрон № 2 устанавливают на алонж с отводом для вакуума,
сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см3
(используют как емкость для элюентов).
Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 10 см3
смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:5. Элюат отбрасывают.
Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.
7.7.2. Проверка хроматографического поведения
циантранилипрола на концентрирующем патроне № 2.
Из стандартного раствора циантранилипрола в ацетонитриле,
содержащего 1 мкг/см3, отбирают 1 см3, помещают в
концентратор объемом 100 см3 и упаривают на ротационном вакуумном
испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1
см3 ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют
5 см3 воды, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в
концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.
Исходный концентратор обмывают последовательно двумя
порциями по 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:5.
Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные
концентраторы объемом 100 см3, упаривают досуха на ротационном
вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в
2 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3
пробы вводят в хроматограф.
Определяют фракции, содержащие циантранилипрол, полноту смывания
с патрона и необходимый объём элюента.
Изучение поведения циантранилипрола на концентрирующих
патронах № 2 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой
партии концентрирующих патронов.
7.8.1. Подготовка концентрирующих патронов № 2 для
очистки экстракта.
Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость
потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин (1 - 2
кап./с).
Патрон № 2 устанавливают на алонж с отводом для вакуума,
сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см3
(используют как емкость для элюентов).
Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 см3
гексана. Элюат отбрасывают.
Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.
7.8.2. Проверка хроматографического поведения
циантранилипрола на концентрирующем патроне № 2.
Из стандартного раствора циантранилипрола в ацетонитриле,
содержащего 1 мкг/см3, отбирают 1 см3, помещают в
концентратор объемом 100 см3 и упаривают на ротационном вакуумном
испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 5
см3 хлористого метилена, тщательно обмывая стенки концентратора,
прибавляют 5 см3 гексана, перемешивают и вносят на патрон. Элюат
собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.
Исходный концентратор обмывают последовательно 20 см3
смеси гексана с хлористым метиленом в соотношении 1:1, 20 см3 смеси
гексана с хлористым метиленом в соотношении 1:2, 20 см3 смеси
гексана с ацетоном в соотношении 1:1. Элюат после прохождения каждой порции
элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом 100 см3,
упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30
°С. Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетонитрила с водой в
соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.
Определяют фракции, содержащие циантранилипрол, полноту
смывания с патрона и необходимый объём элюента.
Изучение поведения циантранилипрола на концентрирующих
патронах № 2 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой
партии концентрирующих патронов.
Хроматографическую колонку с предколонкой устанавливают в
термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 30 °С и скорости потока
подвижной фазы 1 см3/мин 3 - 4 ч.
Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными
правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и
объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», № 2051-79
от 21.08.79, а также в соответствии с ГОСТ Р
51592-2000 «Вода. Общие требования к отбору проб», ГОСТ
17.4.3.01-83 «Почвы. Общие требования к отбору проб», ГОСТ
28168-89 «Почвы. Отбор проб», ГОСТ
Р 51810-2001 «Томаты свежие, реализуемые в розничной торговой сети» и ГОСТ
Р 52183-2003 «Консервы. Соки овощные. Сок томатный. ТУ», ГОСТ
Р 51783-2001 «Лук репчатый свежий, реализуемый в розничной торговой сети.
ТУ», ГОСТ
Р 51809-2001 «Капуста белокочанная свежая, реализуемая в розничной торговой
сети», ГОСТ
1724-85 «Капуста белокочанная свежая, заготовляемая и поставляемая. ТУ».
Пробы воды и томатного сока хранят в стеклянной герметично
закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °С не более 10 суток.
Для длительного хранения проб почвы почву подсушивают при
комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные
образцы могут храниться в темной таре в течение года. Перед анализом сухую
почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.
Пробы томатов, лука и капусты хранят в холодильнике в
полиэтиленовых пакетах при температуре 0 - 4 °С не более суток. Для длительного
хранения пробы замораживают и хранят в полиэтиленовой таре в морозильнике при
температуре (-18) °С до двух лет.
9.1.1. Экстракция.
Пробу воды объемом 100 см3 помещают в делительную
воронку объемом 250 см3. Циантранилипрол экстрагируют тремя порциями
хлористого метилена объемом по 30 см3, встряхивая каждый
разделительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной
воронке нижний слой (хлористый метилен) объединяют в концентраторе объемом 250
см3, собирая его через слой безводного сульфата натрия. Объединенный
экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре
не выше 30 °С.
Сухой остаток растворяют в 5 см3 смеси
ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в
хроматограф.
9.2.1. Экстракция и очистка
полученного экстракта перераспределением в системе несмешивающихся
растворителей.
Образец почвы массой 20 г помещают в полипропиленовую банку
для экстракции и центрифугирования объемом 200 см3, прибавляют 75 см3
ацетонитрила и помещают на 5 мин в ультразвуковую ванну. Затем пробу
центрифугируют в течение 4 мин при скорости 4000 об./мин. Супернатант фильтруют
через фильтр низкой плотности в колбу объемом 250 см3 с 10 г сухого
хлористого натрия. Экстракцию повторяют еще два раза в тех же условиях,
используя по 50 см3 ацетонитрила. Ацетонитрильные экстракты
объединяют в колбе объемом 250 см3 с 10 г сухого хлористого натрия,
перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 10 мин.
Объединенный экстракт из колбы переносят в делительную
воронку объемом 250 см3 (не растворившуюся соль оставляют в колбе),
оставляют до полного разделения слоев и нижний (водный) слой отбрасывают.
К ацетонитрильному экстракту в делительной воронке
прибавляют 50 см3 гексана и интенсивно встряхивают 2 мин. После
полного разделения фаз отбрасывают выделившийся нижний водный слой и верхний
гексановый слой, ацетонитрильный экстракт переносят в химический стакан объемом
200 см3. Затем ацетонитрильный экстракт возвращают в делительную
воронку и еще раз промывают 50 см3 гексана в тех же условиях.
Верхний слой отбрасывают, а ацетонитрильный экстракт собирают через слой
безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 см3, осушитель
обмывают 10 см3 ацетинитрила, смыв объединяют с основным экстрактом
и объединенный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе
при температуре не выше 30 °С.
9.2.2. Очистка экстракта
перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.
К сухому остатку в концентраторе, полученному по п. 9.2.1, прибавляют 3 см3
ацетона, обмывают стенки колбы, прибавляют 50 см3 дистиллированной
воды и 10 см3 насыщенного раствора соли, перемешивают и переносят в
делительную воронку объемом 250 см3. Экстракт в делительной воронке
промывают двумя порциями гексана объемом по 30 см3, интенсивно
встряхивая делительную воронку каждый раз по 2 мин. После полного разделения
фаз отбрасывают верхний гексановый слой, нижний водный слой возвращают в
делительную воронку.
Циантранилипрол экстрагируют тремя порциями хлористого
метилена объемом по 20 см3, встряхивая делительную воронку каждый
раз по 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой
(хлористый метилен) объединяют в концентраторе объемом 250 см3,
пропуская его через слой безводного сульфата натрия, и объединенный экстракт
упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30
°С.
9.2.3. Очистка экстракта на колонке с
окисью алюминия.
Сухой остаток, полученный в п. 9.2.2, растворяют в 10 см3 ацетонитрила,
тщательно обмывают стенки концентратора и вносят на подготовленную колонку,
элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают последовательно 10 см3
ацетонитрила, затем двумя порциями по 10 см3 каждая 0,1 %-го
раствора уксусной кислоты в ацетонитриле и вносят на колонку. Элюаты
отбрасывают.
Циантранилипрол элюируют 30 см3 0,5 %-го раствора
уксусной кислоты в ацетонитриле. Элюат собирают в концентратор объемом 100 см3
и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше
30 °С.
9.2.4. Очистка экстракта на
концентрирующих патронах № 1.
Сухой остаток, полученный в п. 9.2.3., растворяют в 1 см3 ацетонитрила,
тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 см3 воды,
перемешивают и вносят на подготовленный патрон. Элюат отбрасывают. Исходный
концентратор обмывают последовательно 10 см3 смеси ацетонитрила с
водой в соотношении 1:9 и 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в
соотношении 1:5. Элюаты отбрасывают.
Циантранилипрол элюируют 10 см3 смеси
ацетонитрила с водой в соотношении 1:1. Элюат собирают в концентратор объемом
100 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при
температуре не выше 30 °С.
9.2.5. Очистка экстракта на
концентрирующих патронах № 3.
Сухой остаток, полученный в п. 9.2.3., растворяют в 2 см3 ацетона,
тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 8 см3 гексана,
перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор объемом 100 см3.
Исходный концентратор обмывают 10 см3 смеси гексана с ацетоном в
соотношении 2:1. Элюаты объединяют и упаривают досуха на ротационном вакуумном
испарителе при температуре не выше 30 °С.
Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси
ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в
хроматограф.
9.3.1. Экстракция и очистка
полученного экстракта перераспределением в системе несмешивающихся
растворителей.
Образец измельченных плодов томата (или лука-репки) массой
20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 см3,
прибавляют 50 см3 ацетонитрила и помещают на 5 мин в ультразвуковую
ванну. Ацетонитрильный экстракт фильтруют в плоскодонную колбу объемом 250 см3
с 10 г сухого хлористого натрия. Экстракцию повторяют двумя порциями
ацетонитрила объемом по 50 см3 в тех же условиях. Ацетонитрильные
экстракты объединяют в колбе объемом 250 см3 с 10 г сухого
хлористого натрия, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 10
мин.
Объединенный экстракт из колбы переносят в делительную
воронку объемом 250 см3 (не растворившуюся соль оставляют в колбе),
оставляют до полного разделения слоев и нижний (водный) слой отбрасывают.
Далее проводят очистку экстракта как указано в п.п. 9.2.2. «Очистка экстракта
перераспределением в системе несмешивающихся растворителей», 9.2.3. «Очистка экстракта на колонке с окисью
алюминия», 9.2.4. «Очистка
экстракта на концентрирующих патронах № 1» и 9.2.5. «Очистка экстракта на концентрирующих
патронах № 3».
Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси
ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в
хроматограф.
9.4.1. Экстракция.
Образец измельченного пера лука массой 20 г помещают в
полипропиленовую банку для экстракции, прибавляют 50 см3
ацетонитрила и помещают на 5 мин в ультразвуковую ванну. Далее проводят
экстракцию и очистку полученного экстракта как указано в п. 9.3.1. «Экстракция и очистка полученного экстракта
перераспределением в системе несмешивающихся растворителей».
Затем проводя т очистку экстракта как указано в п.п. 9.2.2. «Очистка экстракта
перераспределением в системе несмешивающихся растворителей» и 9.2.3. «Очистка экстракта на
колонке с окисью алюминия».
9.4.2. Очистка экстракта на концентрирующих патронах № 2
с использованием водно-органических смесей.
Сухой остаток растворяют в 1 см3 ацетонитрила, тщательно
обмывая стенки концентратора, прибавляют 5 см3 воды, перемешивают и
вносят на подготовленный патрон. Элюат собирают в концентратор объемом 100 см3.
Исходный концентратор обмывают 5 см3 смеси ацетонитрила с водой в
соотношении 1:5 и вносят на патрон. Элюаты объединяют и упаривают досуха на
ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
Далее проводят очистку экстракта как указано в п. 9.2.5. «Очистка экстракта на
концентрирующих патронах № 3».
Сухой остаток, полученный после очистки, растворяют в 2 см3
смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в
хроматограф.
9.5.1. Экстракция и очистка полученного экстракта
перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.
Образец томатного сока массой 20 г помещают в
полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 см3,
прибавляют 100 см3 ацетонитрила и интенсивно встряхивают 2 мин. Затем
пробу центрифугируют в течение 4 мин при скорости 4000 об./мин. Супернатант
фильтруют через фильтр низкой фильтрации в колбу объемом 250 см3 с
10 г сухого хлористого натрия и оставляют при комнатной температуре на 10 мин.
Объединенный экстракт из колбы переносят в делительную
воронку объемом 250 см3 (не растворившуюся соль оставляют в колбе),
оставляют до полного разделения слоев и нижний (водный) слой отбрасывают.
Далее проводят очистку экстракта как указано в п.п. 9.2.2. «Очистка экстракта
перераспределением в системе несмешивающихся растворителей», 9.2.3. «Очистка экстракта на колонке с окисью
алюминия», 9.2.4. «Очистка
экстракта на концентрирующих патронах № 1» и 9.2.5. «Очистка экстракта на концентрирующих
патронах № 3».
Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси
ацетонитрил-вода в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в
хроматограф.
9.6.1. Экстракция.
Образец измельченной капусты массой 20 г помешают в
полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 см3, прибавляют 50
см3 ацетона и помещают на 5 мин в ультразвуковую ванну. Ацетоновый
экстракт фильтруют через рыхлый ватный тампон в банку для экстракции и
центрифугирования объемом 200 см3. Экстракцию повторяют двумя
порциями ацетона объемом по 50 см3 в тех же условиях. Ацетоновый
экстракт объединяют и центрифугируют в течение 4 мин при скорости 4000 об./мин,
а затем фильтруют через фильтр «красная лента» в концентратор объемом 250 см3
и осторожно упаривают (вскипает!) порциями по 50 см3 до водного
остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
Далее проводят очистку экстракта как указано в п.п. 9.2.2. «Очистка экстракта
перераспределением в системе несмешивающихся растворителей», 9.2.3. «Очистка экстракта на колонке с окисью
алюминия» п. 9.2.4. «Очистка
экстракта на концентрирующих патронах № 1».
При недостаточной чистоте пробы дополнительно очищают на
концентрирующем патроне № 2 по следующей схеме.
9.6.2. Очистка экстракта на концентрирующих патронах № 2
с использованием органических растворителей.
Сухой остаток растворяют в 5 см3 хлористого
метилена, прибавляют 5 см3 гексана, перемешивают и вносят на патрон.
Элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают последовательно 20 см3
смеси гексана с хлористым метиленом в соотношении 1:1, 20 см3 смеси
гексана с хлористым метиленом в соотношении 1:2, элюаты отбрасывают.
Циантранилипрол элюируют с патрона 20 см3 смеси гексана с ацетоном в
соотношении 1:1. Элюат собирают в концентратор объемом 100 см3,
упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30
°С.
Сухой остаток растворяют в 2 см3 смеси
ацетонитрила с водой в соотношении 7:3 и 20 мм3 пробы вводят в
хроматограф.
9.7.
Условия хроматографирования
Хроматографическая система, включающая:
- хроматограф жидкостный, снабженный термостатом для колонок
с диапазоном температур от 15 до 80 °С, с ультрафиолетовым детектором с
изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на
шкалу;
- компьютерное программное обеспечение, контролирующее
работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в
процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку
результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ.
Колонка хроматографическая стальная, длиной 250 мм, с
внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми
полярными группами С18.
Предколонка хроматографическая стальная, длиной 20,0 мм,
внутренним диаметром 3,9 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми
полярными группами С8.
Температура колонки: 30 °С.
Подвижная фаза: ацетонитрил-вода-муравьиная кислота в
соотношении 450:500:1.
Длина волны: 265 нм.
Объем вводимой пробы 20 мм3.
Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2 -
20 нг.
Содержание циантранилипрола в
пробах рассчитывают по формуле:
X - содержание
циантранилипрола в пробе, мг/кг или мг/дм3;
Sст. - высота (площадь) пика стандарта,
мм;
Sпр. - высота
(площадь) пика образца, мм;
А - концентрация стандартного раствора, мкг/см3;
V - объем экстракта, подготовленного для
хроматографирования, см3;
m -
масса анализируемого образца, г (см3);
Р - содержание циантранилипрола в аналитическом
стандарте, %.
11.
Проверка приемлемости результатов
параллельных определений
За результат анализа принимают
среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение
между которыми не превышает предела повторяемости:

|
(1)
|
Х1, Х2
- результаты параллельных определений, мг/кг;
r - значение предела
повторяемости, % (табл. 1), при этом r = 2,8×σr.
При невыполнении условия (1)
выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь
выполняют анализ.
Результат анализа представляют в
виде:
мг/кг при вероятности Р =
0,95, где
|
- среднее арифметическое результатов
определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
Δ - граница абсолютной
погрешности, мг/кг;
δ - граница
относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с
диапазоном концентраций, табл. 1), %.
В случае если содержание компонента менее нижней границы
диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг».*
* - 0,01 мг/кг - предел обнаружения.
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости
измерений, а также контроль стабильности градуировочной характеристики
осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002
«Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
Стабильность результатов измерений контролируют перед
проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
Контроль стабильности градуировочной характеристики для
циантранилипрола проводят при смене основных градуировочных растворов № 1, 2,
3, 4, 5 и 6 каждые 2 месяца, а также в начале и при окончании каждой серии
анализов.
При контроле стабильности градуировочной характеристики
проводят измерения не менее трех образцов концентраций для градуировки,
содержание циантранилипрола в которых должно охватывать весь диапазон
концентраций от 0,1 до 1,0 мкг/см3.
Градуировочная характеристика
считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля
градуировочного раствора сохраняется соотношение:
X - концентрация
циантранилипрола контрольного измерения, мкг/см3;
С - известная концентрация градуировочного раствора
циантранилипрола в смеси ацетонитрила с водой в соотношении 7:3, взятая для
контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
3,23 - погрешность градуировочной характеристики, %.
Если величина расхождения (А) превышает 3,23 %, делают вывод
о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших
измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности
градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с
использованием других градуировочных растворов циантранилипрола,
предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности
градуировочной характеристики определяют ее заново согласно п. 7.3.
Величина добавки Сд
должна удовлетворять условию:
- характеристика погрешности
(абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию
компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в
образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:
Δ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;
δ - граница относительной
погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном
концентраций, табл. 1), %.
Результат контроля процедуры Кк
рассчитывают по формуле:
- среднее арифметическое результатов
параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11), содержания компонента
в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки,
соответственно, мг/кг.
Норматив контроля К
рассчитывают по формуле:
Проводят сопоставление результата
контроля процедуры Кк с нормативом контроля (К).
Если результат контроля
процедуры удовлетворяет условию:
процедуру анализа
признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (2)
процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным
результатам, и принимают меры по их устранению.
Расхождение между результатами
измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные
операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

|
(3)
|
Х1, Х2
- результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
R - предел воспроизводимости (в соответствии с
диапазоном концентраций, табл. 1), %.
Полнота извлечения циантранилипрола
из воды, почвы, капусты, плодов томата и томатного сока,
лука-репки и лука-пера (5 повторностей для каждой
концентрации, Р = 0,95)
Среда
циантранилипрола
|
Внесено
циантранилипрола, мг/кг (мг/дм3)
|
Обнаружено
циантранилипрола, мг/кг (мг/дм3)
|
Полнота определения, %
|
1
|
2
|
3
|
4
|
Вода
|
0,005
|
0,0048
± 0,0001
|
95,2
|
0,010
|
0,0097
± 0,0002
|
97,0
|
0,020
|
0,0192
± 0,0002
|
96,0
|
0,050
|
0,0495
± 0,0004
|
99,1
|
Почка
|
0,01
|
0,0074
± 0,0001
|
74,0
|
0,02
|
0,0147
±0,0003
|
73,6
|
0,05
|
0,0373
± 0,0003
|
74,6
|
0,10
|
0,0730
± 0,0017
|
73,0
|
Капуста
|
0,01
|
0,0074
± 0,0001
|
74,0
|
0,02
|
0,0149
± 0,0001
|
74,6
|
0,05
|
0,0375
± 0,0007
|
75,0
|
0,10
|
0,0748 ± 0,0013
|
74,8
|
Плоды
томата
|
0,01
|
0,0077
± 0,0001
|
77,0
|
0,02
|
0,0151
± 0,0002
|
75,6
|
0,05
|
0,0383
±0,0001
|
76,5
|
0,10
|
0,0794 ± 0,0012
|
79,4
|
Томатный
сок
|
0,01
|
0,0079
± 0,0002
|
79,0
|
0,02
|
0,0153 ± 0,0002
|
76,4
|
0,05
|
0,0395
± 0,0006
|
78,9
|
0,10
|
0,0792
± 0,0015
|
79,2
|
Лук-репка
|
0,01
|
0,0075
± 0,0001
|
75,0
|
0,02
|
0,0149
± 0,0001
|
74,3
|
0,05
|
0,0385
± 0,0005
|
77,0
|
0,10
|
0,0773
± 0,0013
|
77,3
|
Лук-перо
|
0,01
|
0,0075
± 0,0002
|
75,0
|
0,02
|
0,0151
± 0,0001
|
75,3
|
0,05
|
0,0368
± 0,0009
|
73,5
|
0,10
|
0,0760
± 0,0009
|
76,0
|