На главную
На главную

Измерение концентраций этабоксама в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов массовой концентрации этабоксама в диапазонах соответственно 0,2 — 0,2 мг/м3, 0,2 — 2,0 мкг/смыв.

Обозначение: МУК 4.1.2288-07
Название рус.: Измерение концентраций этабоксама в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Статус: действует
Дата актуализации текста: 05.05.2017
Дата добавления в базу: 01.09.2013
Дата введения в действие: 28.12.2007
Утвержден: 10.10.2007 Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач РФ
Опубликован: Роспотребнадзор (2008 г. (сборник))
Ссылки для скачивания:

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование
Российской Федерации

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций химических
веществ в воздухе рабочей зоны и смывах
с кожных покровов операторов

Сборник методических указаний
МУК 4.1.2282-07, МУК 4.1.2208-07
МУК 4.1.2289-07, МУК 4.1.2338-08
МУК 4.1.2348-08

Москва • 2008

Содержание

1. Погрешность измерений. 3

2. Метод измерений. 3

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы.. 3

3.1. Средства измерений. 3

3.2. Реактивы.. 3

3.3. Вспомогательные устройства, материалы.. 4

4. Требования безопасности. 4

5. Требования к квалификации операторов. 4

6. Условия измерений. 4

7. Подготовка к выполнению измерений. 5

7.1. Очистка органических растворителей. 5

7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ.. 5

7.3. Кондиционирование хроматографической колонки. 5

7.4. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения. 5

7.5. Установление градуировочной характеристики. 6

7.6. Подготовка фильтров для отбора проб воздуха. 6

7.7. Подготовка салфеток для проведения смыва. 6

8. Отбор и хранение проб воздуха. 6

9. Условия проведения смыва. 7

10. Выполнение измерений. 7

10.1. Воздушная среда. 7

10.2. Смывы с кожных покровов. 7

11. Обработка результатов анализа. 7

11.1. Воздушная среда. 7

11.2. Смывы с кожных покровов. 8

12. Оформление результатов измерений. 8

13. Контроль погрешности измерений. 8

14. Разработчики. 9

 

 

УТВЕРЖДАЮ

Руководитель Федеральной службы

по надзору в сфере защиты прав

потребителей и благополучия человека,

Главный государственный санитарный

врач Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

10 октября 2007 г.

Дата введения: 28 декабря 2007 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций этабоксама в воздухе
рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания
МУК 4.1.2288-07

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов массовой концентрации этабоксама в диапазонах соответственно 0,2 - 0,2 мг/м3, 0,2 - 2,0 мкг/смыв.

(RS)-(α-циан-2-тенил)-4-этил-2-(этиламин)-5-триазолкарбоксамид (IUPAС)

C14H16N4OS2

Мол. масса 320,4

Твердый белый порошок без запаха. Разлагается до температуры плавления (185 - 187 °С). Давление паров при 25 °С - 8,1×10-5 Па. Плотность - 1,24 (25 °С). Растворимость в органических растворителях при 20 °С (в г/дм3): ацетон - 39,7; метанол - 17,6; этилацетат - 10,6; 1,2-дихлорэтан - 2,9; ксилол - 0,136; н-октанол - 0,374; н-гептан - 3,92×10-4. Растворимость в воде (25 °С, pH 7) - 5,2 мг/дм3. Коэффициент распределения н-октанол/вода: KOWlogP = 2,98 (20 °С, pH 7). Гидролитически стабилен при pH 4 - 9, период полураспада в водном растворе при 20 °С составляет: 194 дня (pH 4); более 3-х лет (pH 7); 163 дня (pH 9).

Агрегатное состояние в воздушной среде - аэрозоль.

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс - более 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) для крыс - более 5000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC50) для крыс - более 4890 мг/м3 (4 ч).

Область применения препарата

Этабоксам - системный фунгицид, обладающий защитными и лечебными свойствами против оомицетных болезней культурных растений. Рекомендуется для применения на винограде (ложная мучнистая роса) и картофеле (фитофтороз).

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) этабоксама в воздухе рабочей зоны - 1,4 мг/м3.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ±25 %, при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерений

Измерения концентраций этабоксама выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование этабоксама из воздуха осуществляют на бумажный фильтр «синяя лента», экстракцию с фильтров проводят ацетоном. Смыв с кожных покровов проводят этиловым спиртом.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 2 нг. Средняя полнота извлечения с фильтров - 93,4 %, с поверхности кожи - 92,5 %.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений

Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны (фирмы Waters, США)

Номер в Государственном реестре средств измерений 15311-02

Барометр-анероид М-67

ТУ 2504-1797-75

Весы аналитические ВЛА-200

ГОСТ 24104

Колбы мерные 2-50-2, 2-100-2 и 2-1000-2

ГОСТ 1770

Меры массы

ГОСТ 7328

Пипетки градуированные 2-го класса точности, вместимостью 1,0, 2,0, 5,0, 10 см3

ГОСТ 29227

Пробирки градуированные, вместимостью 5 или 10 см3

ГОСТ 1770

Пробоотборное устройство ОП-442ТЦ (ЗАО «ОПТЭК», г. Санкт-Петербург)

Номер в Государственном реестре средств измерений 18860-05

Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1 °С, пределы измерения 0 - 55 °С

ТУ 215-73Е

Цилиндры мерные 2-го класса точности, вместимостью 10, 250, 500 и 1000 см3

ГОСТ 1770

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Этабоксам, аналитический стандарт с содержанием основного вещества 99,6 % (фирмы «Сумитомо Кемикал Корпорейшн, Лимитед»)

 

Ацетон, чда

ГОСТ 2603

Ацетонитрил для хроматографии, хч

ТУ 6-09-4326-76

Вода бидистиллированная, деионизованная или перегнанная над KМnO4

ГОСТ 6709

Кислота ортофосфорная, хч, 85 %

ГОСТ 6552

Этиловый спирт (этанол) ректификованный

ГОСТ Р 51652 или ГОСТ 18300

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

3.3. Вспомогательные устройства, материалы

Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с

ТУ 64-1-2851-78

Бумажные фильтры «синяя лента», обеззоленные

ТУ 6-09-2678-77

Бязь хлопчатобумажная белая

 

Воронки конусные диаметром 30 - 37 мм

ГОСТ 25336

Груша резиновая

 

Колбы круглодонные на шлифе, вместимостью 100 см3

ГОСТ 9737

Мембранные фильтры капроновые, диаметром 47 мм

 

Насос водоструйный

ГОСТ 10696

Пробирки центрифужные

ГОСТ 25336

Ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi, Швейцария

 

Стаканы химические низкие с носиком, вместимостью 150 см3

ГОСТ 25336

Стекловата

 

Стеклянные емкости вместимостью 100 см3 с герметичной металлической крышкой

 

Стеклянные палочки

 

Установка для перегонки растворителей

 

Набор для фильтрации растворителей через мембрану

 

Хроматографическая колонка стальная, длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Symmetry® C18, зернением 5 мкм

 

Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа, вместимостью 50 - 100 мм3

 

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

• процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %.

• выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров и салфеток для отбора проб, отбор проб.

7.1. Очистка органических растворителей

7.1.1. Ацетон

Ацетон перегоняют над небольшим количеством KМnO4 и прокаленным карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50.

7.1.2. Ацетонитрил

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 700 см3 бидистиллированной или деионизованной воды, 300 см3 ацетонитрила, 1 см3 ортофосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.3. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.2) при скорости подачи растворителя 1,0 см3/мин до установления стабильной базовой линии.

7.4. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения

7.4.1. Исходный раствор этабоксама для градуировки (концентрация 1 мг/см3)

В мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 0,1000 г этабоксама, добавляют 50 - 70 см3 ацетонитрила, перемешивают, доводят ацетонитрилом до метки, вновь перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3-х месяцев.

Растворы № 1 - 5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

7.4.2. Раствор № 1 этабоксама для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см3)

В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 1 см3 исходного раствора этабоксама с концентрацией 1 мг/см3 (п. 7.4.1), разбавляют ацетонитрилом до метки, перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесено-найдено».

7.4.3. Рабочие растворы № 2 - 5 этабоксама для градуировки (концентрация 0,1 - 1,0 мкг/см3)

В 4 мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают по 1,0, 2,5, 5,0 и 10,0 см3 градуировочного раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см3 (п. 7.4.2), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по п. 7.2 тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 2 - 5 с концентрацией этабоксама 0,1, 0,25, 0,5 и 1,0 мкг/см3, соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике в течение 2-х недель.

7.5. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мкВ × с) от концентрации этабоксама в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки №№ 2 - 5.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.5.1. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площади пиков действующего вещества.

Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2-х растворов для градуировки различной концентрации. Если значения площадей отличаются более чем на 5 % от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.

7.5.1. Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

Жидкостной хроматограф «Breeze» с ультрафиолетовым детектором (фирма Waters, США)

Хроматографическая колонка стальная, длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Symmetry® С18, зернением 5 мкм

Температура колонки: комнатная

Подвижная фаза: ацетонитрил-вода-ортофосфорная кислота (30:70:0,1, по объему)

Скорость потока элюента: 1,0 см3/мин

Рабочая длина волны: 235 нм

Чувствительность: 0,005 ед. абсорбции на шкалу

Объем вводимой пробы: 20 мм3

Ориентировочное время выхода этабоксама: 7,5 - 7,8 мин

Линейный диапазон детектирования: 2 - 20 нг.

7.6. Подготовка фильтров для отбора проб воздуха

Диаметр бумажного фильтра «синяя лента» должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродержателя.

Фильтры последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом, затем ацетонитрилом порциями 25 - 30 см3, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

7.7. Подготовка салфеток для проведения смыва

Вырезают салфетки (лоскуты) из белой бязи размером 10×10 см, последовательно обрабатывают их 5 %-ым раствором углекислого натрия (при кипячении), водой до нейтральной реакции промывных вод, 2-х кратно промывают этиловым спиртом, сушат на воздухе при комнатной температуре. До использования салфетки хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

8. Отбор и хранение проб воздуха

Отбор проб проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны». Воздух с объемным расходом 2 - 4 дм3/мин аспирируют через бумажный фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации этабоксама на уровне 0,5 ОБУВ для воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 1 дм3 воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в морозильной камере при температуре -18 °С - 15 дней.

9. Условия проведения смыва

Смывы проводят в конце работы или после выполнения отдельных операций с открытых и закрытых спецодеждой или другими СИЗ участков тела (лоб, лицо, шея, спина, грудь, предплечье, голень, кисти рук, включая межпальцевые промежутки).

До работы выбирают участок кожи, обрабатывают его с целью удаления загрязнений, фиксируют площадь (не менее 200 см2). При необходимости отбирают фоновые смывы.

Смыв проводят способом обмыва фиксированного участка кожи этиловым спиртом, помещая 20 см3 в стеклянную емкостью с металлической крышкой. Тканевой салфеткой, смоченной растворителем, с помощью пинцета (индивидуально) обмывают кожный покров сверху вниз. Операцию повторяют дважды.

Срок хранения отобранных проб смывов, помещенных в герметично закрытые емкости, в морозильной камере при температуре -18 °С - 15 дней.

10. Выполнение измерений

10.1. Воздушная среда

Экспонированный фильтр переносят в химический стакан вместимостью 150 см3, заливают 20 см3 ацетона, помещают на встряхиватель на 30 мин. Растворитель сливают, фильтр обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 20 см3 еще дважды, выдерживая на встряхивателе по 10 мин.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 5 см3 подвижной фазы (подготовленной по п. 7.2) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.5.1.

10.2. Смывы с кожных покровов

Пробу смыва сливают (через воронку) в колбу для упаривания, с помощью пинцета извлекают салфетку, помещают в конусную химическую воронку, установленную в муфту колбы для упаривания, тщательно отжимают и промывают этиловым спиртом дважды порциями по 10 см3, предварительно ополаскивая растворителем емкость, в которой находилась проба.

Объединенный раствор упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 2 см3 подвижной фазы (подготовленной по п. 7.2) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.5.1.

Пробу вводят в испаритель хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика действующего вещества, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию этабоксама в хроматографируемом растворе.

Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 1,0 мкг/см3, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 50 раз).

Перед анализом опытных образцов проводят хроматографирование холостых (контрольных) проб - экстрактов неэкспонированного фильтра и салфетки.

11. Обработка результатов анализа

11.1. Воздушная среда

Массовую концентрацию этабоксама в пробе воздуха X, мг/м3, рассчитывают по формуле:

Х = С × W / Vt, где

С - концентрация этабоксама в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;

Vt - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °С), дм3.

Vt = 0,386 × P × ut / (273 + T), где

Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С,

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.

u - расход воздуха при отборе пробы, дм3/мин,

t - длительность отбора пробы, мин.

За результат анализа  принимается среднее арифметическое результатов двух параллельных определений X1 и Х2 расхождение между которыми не превышает значений норматива оперативного контроля сходимости (d):

d - норматив оперативного контроля сходимости, мг/м3;

dотн - норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 12 %).

11.2. Смывы с кожных покровов

Массовую концентрацию этабоксама в пробе смыва X, мкг/смыв, рассчитывают по формуле:

Х = С × W, где

С - концентрация этабоксама в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;

Примечание: Идентификация и расчет концентрации этабоксама в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

12. Оформление результатов измерений

Результат количественного анализа представляют в виде:

результат анализа  в мг/м3 или мкг/смыв (с указанием площади смыва в см2), характеристика погрешности δ, % (±25 %), Р = 0,95 или

 (мкг/смыв, площадь смыва, см2), Р = 0,95, где

∆ - абсолютная погрешность.

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание этабоксама в пробе воздуха рабочей зоны - менее 0,2 мг/м3; смыва - менее 0,2 мкг/смыв»*

* - 0,2 мг/м3; 0,2 мкг/смыв - пределы обнаружения при отборе 2,5 дм3 воздуха рабочей зоны; в пробе смыва (фиксированная площадь смыва, см2), соответственно.

13. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1 - 6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

14. Разработчики

Т.В. Юдина, Н.Е. Федорова, В.Н. Волкова (ФГУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана Роспотребнадзора»).

64
Мне нравится
Комментировать Добавить в закладки

Комментарии могут оставлять только зарегистрированные пользователи.

Пожалуйста зарегистрируйтесь или авторизуйтесь на сайте.